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低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略

王思琦, 李贇, 陈福明, 刘淑杰, 王伟. 低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略[J]. 环境工程学报, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116
引用本文: 王思琦, 李贇, 陈福明, 刘淑杰, 王伟. 低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略[J]. 环境工程学报, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116
WANG Siqi, LI Yun, CHEN Fuming, LIU Shujie, WANG Wei. Strategy on fast start-up of anaerobic ammonia oxidation under low inoculation conditions[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116
Citation: WANG Siqi, LI Yun, CHEN Fuming, LIU Shujie, WANG Wei. Strategy on fast start-up of anaerobic ammonia oxidation under low inoculation conditions[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116

低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略

    作者简介: 王思琦(1992—),男,博士,工程师,wangsq@Tsinghua-sz.org
    通讯作者: 王思琦(1992—),男,博士,工程师,wangsq@Tsinghua-sz.org
  • 中图分类号: X703.1

Strategy on fast start-up of anaerobic ammonia oxidation under low inoculation conditions

    Corresponding author: WANG Siqi, wangsq@Tsinghua-sz.org
  • 摘要: 厌氧氨氧化(Anaerobic ammonia oxidation, anammox)是目前最高效节能的脱氮方式,可以在不加碳源的条件下实现自养高负荷脱氮。然而,厌氧氨氧化菌(Anaerobic ammonia oxidizing bacterial, anAOB)因其生长缓慢,会导致污水处理工艺的启动周期较长。因此,为缩短anammox的启动周期,设置了3种不同污泥接种方式(A:接种500 mg·L−1 anAOB; B:接种500 mg·L−1 anAOB+5 000 mg·L−1反硝化菌;C:接种500 mg·L−1 anAOB+5 000 mg·L−1硝化菌)开展anammox启动实验,分析了底物浓度对脱氮效果的影响以及不同接种条件下微生物群落的差异。结果表明,采用向反应器投加500 mg·L−1 anAOB+5 000 mg·L−1反硝化菌的接种方式,可以实现anammox的快速启动;启动30 d后,总氮去除效率(nitrogen removal rate, NRR)可达1.41 kg·(m3·d)−1以上。微生物群落分析结果表明,反应器中主要存在的anAOB为Candaditue Kuenenia;与单独接种anammox污泥相比,接种反硝化污泥和anammox污泥会使Candaditue Kuenenia的相对丰度提高了40.0%,从而使脱氮效率提高了31.2%。底物浓度对anammox过程的影响结果表明,进水NO2-N质量浓度达到500 mg·L−1时会导致游离亚硝酸(FNA)浓度升高,而当FNA质量超过0.05 mg·L−1时,会严重影响anAOB活性,导致反应器出水水质波动;通过降低进水NO2-N浓度,可以使系统恢复。以上研究结果说明,通过接种反硝化菌和anAOB的方式可实现anammox的快速启动,加速实现anammox工艺在污水处理中大规模应用。
  • 随着环保形势的日益严峻,污染物排放标准愈加严格,尤其是导致水体富营养化的氮元素,如北京市最新标准《北京地方水污染排放标准》(DB 11/307-2013)规定,污水厂出水TN不得高于15 mg·L−1。污水生物处理过程中氮元素的去除是在硝化和反硝化反应共同作用下实现的,但由于我国城镇污水厂进水碳源普遍不足导致反硝化效率低下,使得碳源不足成为制约出水TN达标的重要因素[1]。为解决这一问题,在水厂运行过程中,一般通过投加甲醇等补充碳源的方式提高脱氮效率[2]。然而投加补充碳源不仅增加了运行成本,也会增加剩余污泥的产量[3]。与此同时,在生物处理过程中,微生物将有机物同化为自身细胞物质,以剩余污泥的形式被排出系统。这不仅增加后续污泥处理的成本,还造成了其所含丰富碳源的浪费[4]。在此背景下,研究者们提出多种剩余污泥破解方法并将其作为碳源回用。QIANG等[5]采用臭氧污泥破解液回流至A2/O系统,除磷效果得到明显改善。LIU等[6]研究了污泥水力破解后作为碳源对反硝化速率的影响,发现反硝化速率增加,TN去除率增加。LIU等[7]将碱解发酵污泥破解液作为A2/O系统的反硝化补充碳源,脱氮除磷率均得到明显的提高,并且与传统工艺相比有巨大的经济优势;KONDO等[8]进一步研究了剩余污泥破解回流比对强化反硝化脱氮的影响,发现当污泥破解量为总污泥量9.40%时,剩余污泥排放量减少50%,反硝化效果提高。

    高铁酸盐作为一种氧化性强、绿色、多功能的新型氧化剂,在污泥处理领域已得到了广泛研究和应用,相关研究[9-11]证实了高铁酸盐具有良好的污泥溶胞性能,能有效地破坏污泥细胞,溶出胞内物质。在氧化破解污泥的过程中,Fe6+可被还原为Fe3+,Fe3+可以改善污泥的沉降性能和脱水性能[12-14]。为实现高铁酸盐的工艺利用,本研究采用复合高铁酸盐溶液(composite ferrate solution,CFS)破解污泥,将破解液回流至A/O系统强化反硝化脱氮,即高铁酸盐氧化-A/O工艺(ferrate oxidation-A/O,FO-A/O),详细考察了不同剩余污泥回流比(25%、50% 和100%)对污泥浓度、污泥活性(SOUR)、污泥沉降性能(SVI)及系统出水水质的影响,重点考察了污泥减量效果和脱氮效果,为实现污泥减量及强化脱氮提供参考。

    实验装置由A/O工艺模型和FO污泥破解装置2部分组成(见图1)。在A/O模型中,缺氧池、好氧池和二沉池有效容积分别为4.3、16.4和11.7 L,缺氧池设搅拌器,以确保泥水均匀混合,好氧池底部设置曝气砂头。FO污泥破解装置同时具备污泥破解和沉淀2个功能,沉淀完成后,调节上清液pH,上清液经蠕动泵进入进水箱,与污水混合后一同进入A/O工艺模型。

    图 1  FO-A/O实验装置
    Figure 1.  Experimental device of the FO-A/O process

    实验所用污泥取自天津市北辰区某污水厂,该厂采用A2/O工艺处理生活污水且运行效果良好。工艺进水为模拟生活污水,模拟生活污水由自来水添加葡萄糖、氯化铵、磷酸二氢钾及微量元素[5]配制而成,其水质指标为:COD=223.33 mg·L−1,BOD5=126.90 mg·L−1,TN=30.04 mg·L−1NH+4-N=29.17 mg·L−1NO3-N=0.18 mg·L−1NO2-N=0.09 mg·L−1,TP=3.31 mg·L−1,pH=6.0~7.5。

    CFS为实验室自制,其中FeO24浓度为30.91 g·L−1,ClO浓度为38.63 g·L−1,OH浓度为90.27 g·L−1,其他所用化学药品均为国产分析纯。

    将活性污泥接种至A/O工艺模型启动装置,待出水C、N达到一级A标准后调试完成,A/O模型运行参数为进水流量48 L·d−1、好氧区水力停留时间8.3 h、缺氧区水力停留时间2.1 h,污泥龄15 d、污泥回流比70%、消化液回流比200%、硝化液回流比200%、好氧池溶解氧3.5~7.0 mg·L−1、缺氧池溶解氧0.2~0.5 mg·L−1

    实验装置的运行分为A/O阶段(对照组)和FO-A/O阶段,FO-A/O阶段又分为3种工况,3种工况下剩余污泥破解回流比(r)分别为25%、50%、100%,其中剩余污泥破解回流比指每日被CFS破解的剩余污泥与系统排出剩余污泥干重之比。破解剩余污泥时CFS投加量按50 mg·g−1(以Fe6+计)投加,反应时间为24 h。

    本研究采用污泥产率系数(YOBS)表征系统运行过程中污泥产率的变化,采用比好氧速率(SOUR)表征污泥活性的变化,二者的计算如式(1)和式(2)所示。

    YOBS=QWXW+(QQW)XeQ(S0Se) (1)
    U0=ΔmDOXt (2)

    式中:YOBS为污泥产率系数,g·g−1QW为剩余污泥量,L·d−1Q为进水量,L·d−1XW为剩余污泥浓度,mg·L−1Xe为出水悬浮物浓度,mg·L−1S0为进水SCOD浓度,mg·L−1Se为出水SCOD浓度,mg·L−1U0为污泥比耗氧速率,mg·(g·h)−1;ΔmDO为DO减少量,mg·L−1X为混合液SS浓度,g·L−1t为测试时间,h。

    MLSS、MLVSS、SVI、SS均采用重量法测定,COD采用快速消解法、NH+4-N、TP、TN、NO3NO2均采用分光光度法[15]测定,水质指标测定前使用0.45 μm微孔滤膜过滤;SOUR采用膜电极法[16]测定。

    实验研究了在污泥破解回流比r分别为25%、50%和100%时的FO-A/O工艺的污泥产率系数,分析了污泥破解回流比对污泥减量效果的影响,结果如图2所示。可以看出,污泥产率系数YOBS随着r的增加而明显降低。r=100%时,YOBS=0.04 g·g−1,与A/O对照组(YOBS=0.09 g·g−1)相比减少了55.56%。这是由于在FO-A/O运行过程中产生的部分剩余污泥被CFS溶胞破解,CFS中所含FeO24、ClO以及OH通过氧化[17-18]、皂化[19]的方式破坏污泥细胞,释放出胞内物质,并将难溶的大分子有机物转为容易被微生物所摄取利用的小分子有机物,最终作为碳源被重新利用,从而导致YOBS的降低。当r=50%时,YOBS=0.048 g·g−1,污泥产量较A/O工艺减量46%,该工艺的污泥产率系数低于臭氧+A2/O工艺(YOBS=0.1 g·g−1)和K2FeO4+A2/O工艺(YOBS=0.21 g·g−1)。

    图 2  FO-A/O工艺中污泥破解回流比对污泥减量效果的影响
    Figure 2.  Effect of reflux ratio of disintegrated sludge on waste activated sludge reduction in the FO-A/O process

    污泥破解液回流至A/O系统引入Fe3+,可能会对污泥性能产生影响,因此,本研究探讨了不同剩余污泥破解回流比对A/O工艺中污泥浓度、污泥活性和污泥沉降性能的影响,结果见图3。由图3(a)可知:随着r的升高,污泥浓度逐渐升高,这是由于污泥破解液中含有易降解有机物;随着r的增加,易降解有机物增加,导致微生物数量增加,从而使得污泥浓度有所增加。另外,工艺运行过程中,VSS/SS变化幅度不大,维持在0.74左右,表明破解液回流不会造成系统内惰性物质的积累。

    图 3  FO-A/O工艺中污泥破解回流比对活性污泥性能的影响
    Figure 3.  Effect of reflux ratio of disintegrated sludge on sludge properties in the FO-A/O process

    实验进一步研究了污泥破解液对污泥活性的影响,结果见图3(b),SOUR的计算方法见式(2)。由图3(b)可知,当r为25%和50%时,SOUR分别为7.21 mg·(g·h)−1和7.77 mg·(g·h)−1,均较对照组(6.2 mg·(g·h)−1)有所提高;当r增加至100%,SOUR有所下降。分析其原因是:一方面,由于在r为25%和50%时,适量的Fe3+进入A/O系统,好氧条件下,Fe3+可以作为氧化细胞色素的电子受体,也可以用于多种酶的合成,但过高浓度的Fe3+会对某些酶的活性产生抑制作用[20];另一方面,破解液中含有腐殖酸等难被微生物降解利用的物质,微生物对此类物质降解速率慢,降解速率决定微生物对水中DO的摄取量,随着此类物质的增加,对DO的摄取量减少,SOUR降低。回流的Fe3+除对SOUR产生影响外,还有助于污泥沉降性能的提高,结果见图3(c)。从图3(c)可以看出,随着r的增加,SVI逐渐减小,这源于破解液中Fe3+的絮凝作用,其改变了污泥絮体的大小和结构,强化了污泥密度与水密度之间的差异,使MLSS增大,进而导致SVI减小,改善污泥沉降性能,从而有利于后续污泥脱水处理。但当r=100%时,污泥沉降性能较r=50%时变化不大,这可能是由于此时污泥活性降低所致。

    1)对有机物的去除效果。COD与BOD5为常用的有机污染参数,实验通过测量进出水COD与BOD5的变化来研究有机物的去除效果,结果如图4所示。可以看出,尽管进水COD、BOD5随着r的提高有所增加,但出水COD与BOD5浓度与A/O对照组相比基本保持恒定,均能达到《城镇污水处理场污染物排放标准》一级A标准排放要求。这表明污泥破解液具有良好的可生化性,微生物能够较好地适应并降解破解液回流引入的有机物。此外,在A/O对照组和FO-A/O工艺运行过程中,污泥负荷(F/M)均低于0.15 kg·(kg·d)−1,处于低负荷状态运行,低负荷状态下微生物对COD和BOD5的去除率较高。

    图 4  FO-A/O工艺中污泥破解回流比对COD和BOD5的去除效果的影响
    Figure 4.  Effect of reflux ratio of disintegrated sludge on COD and BOD5 removal efficiency in the FO-A/O process

    2) FO-A/O工艺的脱氮效果。氮是导致水体富营养化的主要元素,也是污水厂深度处理的主要目标物,实验详细研究了污泥破解液作为碳源时FO-A/O工艺对不同形态氮的去除效果,结果见图5。由图5(a)~(d)可见,随着r的提高,破解液中大量氮元素进入A/O系统,导致系统氮负荷增加。但在r=25%和50%工况时,FO-A/O系统对TN、NH+4-N的脱除效果均优于A/O对照组,由图5(c)图5(d)可见,出水NO3-N、NO2-N相比A/O对照组也有所降低,这表明在r为25%和50%时,硝化反硝化效率均有所提高。一方面,这是由于破解液回流改善了系统的C/N比,A/O对照组、r=25%和r=50%时的C/N分别为7.44、7.56和7.79,碳氮比增加为反硝化反应提供了更多的碳源;另一方面,Fe3+作为一种酶促反应激活剂,提高了微生物体内酶的反应效率[21],对硝化和反硝化反应均有一定促进作用。继续增加r至100%时,氮负荷进一步增大,C/N降低,脱氮效果较A/O对照组下降。从FO-A/O工艺运行监测结果可以看出,r的取值对脱氮效果有明显影响,r=50%时,TN的去除率为68.36%~77.59%。该结果优于臭氧+A2/O工艺和K2FeO4+A2/O工艺,与碱解发酵+A2/O和机械法+SBR工艺效果基本相当。由此可见,确定合理的剩余污泥破解回流比是实现污泥减量同步强化脱氮的关键。

    图 5  FO-A/O工艺中污泥破解回流比对脱氮效果的影响
    Figure 5.  Effect of reflux ratio of disintegrated sludge on nitrogen removal efficiency in the FO-A/O process

    为了进一步证实不同剩余污泥破解回流比下破解液作为补充碳源对反硝化脱氮的强化作用,对进出系统的碳、氮进行物料衡算,其中剩余污泥中的COD、TN含量按0.80 g·g−1和0.07 g·g−1[22]计算,衡算的结果如表1所示。可以看出,随着r的增加,碳矿化率逐渐提高,r=100%时,矿化率为93.13%;对氮而言,在A/O对照组及r=25%、r=50%时,随着r的增加,矿化率增大,r=50%时,氮矿化率为71.07%,继续增大r至100%,矿化率虽有所降低,但仍高于对照组。另外,由于剩余污泥的破解回流,随剩余污泥排出系统的碳和氮减少。以上计算结果表明,氮矿化率的提高与碳的矿化率相关,证实了污泥破解液回流引入的有机物被反硝化菌利用,起到强化系统脱氮的作用。

    表 1  C和N物料衡算
    Table 1.  Overall mass balances of C and N elements
    运行工况 C的质量/g N的质量/g
    进水 矿化 出水 剩余污泥 进水 矿化 出水 剩余污泥
    A/O 214.39 181.73 25.96 6.70 28.84 15.98 12.39 0.47
    r=25% 246.31 222.96 18.05 5.30 32.59 20.62 11.60 0.37
    r=50% 275.79 253.71 18.18 3.90 35.50 25.23 10.00 0.27
    r=100% 308.08 284.43 21.15 2.50 44.16 24.96 19.03 0.17
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    3)进出水TP浓度变化。由于CFS含有大量Fe6+,Fe6+在破解污泥过程中被还原为Fe3+,而Fe3+可以通过混凝、沉淀等方式去除水中的磷[23-24],为了明确这部分Fe3+对TP的影响,在实验中监测了进出水TP的变化规律,如图6所示。可以看出,r为25%和50%工况时,进水TP负荷稍有提高,但污泥破解液回流增加了进水碳源,使得污泥活性提高(图3(b)结果),同时引入Fe3+,2种作用同时作用使得TP去除率上升。而当r=100%时,系统对磷的去除效果急剧恶化,出水TP浓度高于A/O对照组。这是由于r=100%时,全部剩余污泥被溶胞破解回流,系统进水TP负荷升高,同时污泥活性大幅度降低(图3(b)),使得磷在系统中累积[25],从而使得出水TP浓度升高,出水水质恶化。在最佳回流比条件下,对TP的平均去除率为39.09%,高于K2FeO4+A2/O工艺的32%。

    图 6  FO-A/O工艺中污泥破解回流比对TP的去除效果的影响
    Figure 6.  Effect of reflux ratio of disintegrated sludge on TP removal efficiency in the FO-A/O process

    运行维修费用在工艺处理系统中占有重要地位,包括药剂费、人工费、电费、维修费及污泥处理费用。本研究在A/O工艺的基础上增加了CFS的费用,1 t污泥需要投加Fe6+ 0.40 kg,其药剂成本约为169元·t−1,相同药剂投加量下市售固体K2FeO4的药剂成本为9 900元·t−1(市售1 400元·kg−1,纯度约20%),同时由于污泥减量46%,因此,减少了后续46%的污泥处理费用(污泥填埋费用约为200元·t−1,污泥焚烧约为100~300元·t−1,污泥堆肥为90~150元·t−1),由此可见,此方法有一定的应用前景。

    1)在传统A/O工艺基础上,增加FO污泥减量装置可以取得良好的污泥减量效果,在r=50%时,YOBS=0.048 g·g−1,相比A/O工艺,污泥减量了46%,此时出水COD、TN、NH+4-N分别为18.83、10.43和4.05 mg·L−1,达到《城镇污水处理场污染物排放标准》一级A标准排放要求。该工艺中药剂制备成本低于固体K2FeO4,且减少了后续污泥处置量,具有一定的应用前景。

    2)破解液污泥回流增加了进水SCOD值,导致微生物量增加,污泥浓度提高,但不会造成系统内惰性物质积累。回流引入的Fe3+可改善污泥沉降性,且适量的Fe3+可作为电子受体,也可用于细胞内多种酶的合成,促进污泥活性,但过多Fe3+则会产生毒害作用,导致污泥活性降低。

    3)污泥破解液回流可提高系统C/N比,且C、N物料衡算结果表明,污泥碳源可被反硝化菌有效利用,起到强化脱氮的效果,且回流的Fe3+对硝化、反硝化反应和除磷均有一定的促进作用,但r=100%回流会导致C/N比降低,脱氮、除磷效果降低。

  • 图 1  厌氧氨氧化实验流程图

    Figure 1.  Schematic diagram of the anammox experiment

    图 2  进出水氮质量浓度的变化和总氮去除率

    Figure 2.  Variation of influent and effluent nitrogen compounds and total nitrogen removal rate

    图 3  氮去除负荷和去除效率变化

    Figure 3.  Variation of nitrogen load rate and nitrogen removal rate

    图 4  NO2与△NH3−N的比值变化

    Figure 4.  Variation of the ratio of NO2−N removal to NH3−N removal

    图 5  FA和FNA的变化

    Figure 5.  Variation of FA and FNA

    图 6  2组氮素转化衡算

    Figure 6.  Nitrogen conversion and balance of two groups

    图 7  微生物群落组成对比

    Figure 7.  Comparison of the composition of microbial communities

    表 1  厌氧氨氧化反应器不同阶段的运行参数

    Table 1.  Operating parameters of different stages of anammox reactor

    阶段运行时间/d进水NH3-N质量浓度/(mg·L−1)进水NO2-N质量浓度/(mg·L−1)RHRTa/hNLR b/(kg·(m3·d)−1)
    I1~61001000120.8
    7~28100100061.6
    29~48150150041.8
    49~54300300152.88
    II55~65500500183
    66~76500500292.67
    77~965005002122
    III97~116400400182.4
      注:a HRT为水力停留时间;b NLR为总氮负荷。
    阶段运行时间/d进水NH3-N质量浓度/(mg·L−1)进水NO2-N质量浓度/(mg·L−1)RHRTa/hNLR b/(kg·(m3·d)−1)
    I1~61001000120.8
    7~28100100061.6
    29~48150150041.8
    49~54300300152.88
    II55~65500500183
    66~76500500292.67
    77~965005002122
    III97~116400400182.4
      注:a HRT为水力停留时间;b NLR为总氮负荷。
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-10-25
  • 录用日期:  2021-12-06
  • 刊出日期:  2022-03-10
王思琦, 李贇, 陈福明, 刘淑杰, 王伟. 低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略[J]. 环境工程学报, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116
引用本文: 王思琦, 李贇, 陈福明, 刘淑杰, 王伟. 低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略[J]. 环境工程学报, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116
WANG Siqi, LI Yun, CHEN Fuming, LIU Shujie, WANG Wei. Strategy on fast start-up of anaerobic ammonia oxidation under low inoculation conditions[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116
Citation: WANG Siqi, LI Yun, CHEN Fuming, LIU Shujie, WANG Wei. Strategy on fast start-up of anaerobic ammonia oxidation under low inoculation conditions[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2022, 16(3): 999-1007. doi: 10.12030/j.cjee.202110116

低接种量条件下实现厌氧氨氧化快速启动的策略

    通讯作者: 王思琦(1992—),男,博士,工程师,wangsq@Tsinghua-sz.org
    作者简介: 王思琦(1992—),男,博士,工程师,wangsq@Tsinghua-sz.org
  • 1. 深圳清华大学研究院,深圳 518057
  • 2. 清研环境科技股份有限公司,深圳 518057
  • 3. 清华大学环境学院,北京 100084

摘要: 厌氧氨氧化(Anaerobic ammonia oxidation, anammox)是目前最高效节能的脱氮方式,可以在不加碳源的条件下实现自养高负荷脱氮。然而,厌氧氨氧化菌(Anaerobic ammonia oxidizing bacterial, anAOB)因其生长缓慢,会导致污水处理工艺的启动周期较长。因此,为缩短anammox的启动周期,设置了3种不同污泥接种方式(A:接种500 mg·L−1 anAOB; B:接种500 mg·L−1 anAOB+5 000 mg·L−1反硝化菌;C:接种500 mg·L−1 anAOB+5 000 mg·L−1硝化菌)开展anammox启动实验,分析了底物浓度对脱氮效果的影响以及不同接种条件下微生物群落的差异。结果表明,采用向反应器投加500 mg·L−1 anAOB+5 000 mg·L−1反硝化菌的接种方式,可以实现anammox的快速启动;启动30 d后,总氮去除效率(nitrogen removal rate, NRR)可达1.41 kg·(m3·d)−1以上。微生物群落分析结果表明,反应器中主要存在的anAOB为Candaditue Kuenenia;与单独接种anammox污泥相比,接种反硝化污泥和anammox污泥会使Candaditue Kuenenia的相对丰度提高了40.0%,从而使脱氮效率提高了31.2%。底物浓度对anammox过程的影响结果表明,进水NO2-N质量浓度达到500 mg·L−1时会导致游离亚硝酸(FNA)浓度升高,而当FNA质量超过0.05 mg·L−1时,会严重影响anAOB活性,导致反应器出水水质波动;通过降低进水NO2-N浓度,可以使系统恢复。以上研究结果说明,通过接种反硝化菌和anAOB的方式可实现anammox的快速启动,加速实现anammox工艺在污水处理中大规模应用。

English Abstract

  • 随着我国餐饮、养殖、制药、食品和皮革等产业的发展,产生了大量的高氨氮废水,如果这些废水排入河流湖泊和地下水,会导致水体富营养化[1-2]。对于此类高氨氮废水,传统的硝化反硝化技术需要大量曝气,在碳氮比较低的情况下还需额外补充大量碳源,产生大量的经济成本。此外,传统的硝化反硝化技术脱氮效率较低,需要较长的水力停留时间(hydraulic retention time, HRT)和较大的占地面积,还会产生大量剩余污泥[3-4]。因此,亟需突破传统脱氮技术运行能耗高、脱氮效率低、占地面积大、剩余污泥产量多等技术瓶颈,开发一种节能、高效、省地和产泥量少的快速脱氮处理技术。厌氧氨氧化(anammox)是迄今最高效节能的脱氮方式[5-6],可以在不加碳源的条件下实现自养高负荷脱氮,污泥产量低。然而,厌氧氨氧化菌(anAOB)的自养性和生长缓慢增加了污水处理工艺的启动期[7]。因此,加快anAOB的生长速率,实现anammox工艺的快速启动及高效脱氮,对于anammox的推广应用及污水处理运行节能减排具有重要的现实意义。

    目前文献中报道的anAOB的倍增周期为10~20 d,anAOB的缓慢生长导致反应器启动时间较长[8]。全球第一座大规模anammox污水处理厂于2002年在鹿特丹建成并投入运行,启动耗时3.5 a,比预期的2 a要长[9]。anAOB的缓慢生长速度和底物的抑制作用以及控制复杂等使得anammox工艺实际应用受到限制[10]。以前的研究通常在反应器中接种厌氧污泥[11]、硝化污泥[12]、反硝化污泥[13],甚至anammox絮凝污泥[14],但由于群落中anammox丰度较低,这些策略通常必须在低进水负荷下启动,导致启动时间更长。显然,尽管anammox工艺已经研究了20多年,但启动周期长仍是其实际应用的主要障碍[15-16]

    Anammox颗粒污泥相对于絮体污泥具有较强的环境适应能力和脱氮性能[17-18],将其作为接种污泥将有助于anammox的启动。此外,贾方旭等[13]关于anAOB与其他细菌之间的协同竞争关系的研究表明,anAOB与硝化菌和反硝化菌在不同条件下存在竞争和协同关系。然而,利用anAOB与其他菌群之间的协同作用加速anammox启动的研究则相对较少,同时硝化菌和反硝化菌相对于anAOB更容易获得。因此,本研究的重点是接种少量成熟anammox颗粒污泥到含有硝化污泥和反硝化污泥的反应器,以验证接种少量anammox颗粒污泥,利用菌群协同机制是否可实现anammox工艺快速启动,并通过氮素转化和氮平衡的计算分析了anammox反应器的脱氮性能,同时采用高通量技术分析了anammox反应器中微生物群落丰度的变化规律。

    • 采用人工配制的模拟废水作为进水,模拟废水的NH3-N、NO2-N和无机碳源使用NH4Cl、NaNO2、NaHCO3按需配置,其他组分包括27.2 mg·L−1 KH2PO4、135.92 mg·L−1 CaCl2·2H2O、300 mg·L−1 MgSO4·7H2O、570 mg·L−1KCl以及1 mL·L−1微量元素I和微量元素II。微量元素I包括5 g·L−1 EDTA和5 g·L−1 FeSO4·7H2O;微量元素II包括15 g·L−1 EDTA、0.014 g·L−1 H3BO4、0.845 g·L−1 MnCl2·4H2O、0.25 g·L−1 CuSO4·5H2O、0.43 g·L−1 ZnSO4·7H2O、0.19 g·L−1 NiCl2·6H2O、0.16 g·L−1 NaSeO4·10H2O、0.22 g·L−1 NaMoO4·2H2O、0.24 g·L−1 CoCl2·6H2O[19]。接种污泥取自实验室培养的anammox种泥、反硝化污泥和硝化污泥,其悬浮固体质量浓度为(mixed liquor suspended solids, MLSS)分别为8 553、6 834和6 532 mg·L−1,挥发性悬浮固体质量浓度(mixed liquid volatile suspended solids, MLVSS)分别为7 095、5 331和5 265 mg·L−1

    • 本研究所用的实验装置如图1所示。实验所用的上流式厌氧污泥床反应器(up-flow anaerobic sludge bed,UASB),反应器由圆柱形有机玻璃制成,内径为7 cm,高为30 cm,工作体积为1 L。反应器内混合液温度通过外置加热带控制,由底部进水,上部溢流出水,底部设置有回流管,部分出水可通过回流管进入反应器内,可通过调整回流液的流量调整反应器回流比(reflux ration, R)。

    • 本研究设置3组实验:A组只接种 500 mg·L−1的anammox污泥,作为空白组;B组接种500 mg·L−1的anammox污泥和5 000 mg·L−1的反硝化污泥;C组接种500 mg·L−1的anammox污泥和5 000 mg·L−1的硝化污泥(污泥质量浓度均以MLSS计)。在整个实验期间,控制3组反应器温度为(35±1) ℃,为了消除pH对反应器性能的影响,通过投加30 g·L−1碳酸氢钠溶液调节系统pH至7.5~8.0。实验分为3个阶段:阶段I(1~54 d),主要考察底物质量浓度对反应器脱氮效果的影响;阶段II(55~96 d),主要考察在高负荷条件下,调整HRT和回流比对反应器脱氮效果的影响;阶段III(97~116 d),通过降低进水负荷考察其对反应器脱氮性能恢复的影响。不同阶段的运行参数见表1。每天取进出水水样并检测水质变化。

    • MLSS、MLVSS、NH3-N、NO2-N和NO3-N用国标法测定[20];COD使用快速测定仪(连华5B-3C,连华科技)测定;DO使用便携式溶解氧仪(HACH-HQ30,哈希水质分析仪器(上海)有限公司)测定和pH使用pH计(FE20K,梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司)测定;反应器中的游离氨(FA)和游离亚硝酸(FNA)的质量浓度分别按照式(1)和式(2)进行计算[21]

      式中:CFA为游离氨质量浓度,mg·L−1CFNA为游离亚硝酸质量浓度,mg·L−1CNH3N为氨氮质量浓度,mg·L−1CNO2N为亚硝酸盐质量浓度,mg·L−1T为温度,℃。

    • 取3组反应器中不同阶段混合液各 50 mL,8 000 r·min−1下离心去除上清液,剩余固体用于微生物分析。依据 E.Z.N.A.®soil DNA kit 对样品进行 DNA 抽提,并使用凝胶电泳和NanoDrop2000检测提取DNA的质量和纯度;使用338F(5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’) 和806R(5’-GACTACHVGGGTWTCTAAT-3’) 对16S rRNA基因V3~V4可变区进行PCR扩增。PCR扩增程序为:首先在95 ℃预变性3 min,然后在95 ℃变性30 s,在55 ℃退火30 s,在72 ℃延伸30 s,并执行27个循环,然后在72 ℃稳定延伸10 min,最后在4 ℃进行保存。每个样本3个重复。将同一样本的PCR扩增产物混合后使用2%琼脂糖凝胶回收,利用AxyPrep DNA Gel Extraction Kit 进行回收产物纯化,2%琼脂糖凝胶电泳检测,并用Quantus™ Fluorometer 对回收产物进行检测定量。最后通过Miseq PE300平台进行测序。

    • 3个反应器的进出水氮素变化如图2所示。在第I阶段,在进水负荷相同的条件下,A组和B组的TN去除率随时间延长逐渐升高,在进水总氮质量浓度由200 mg·L−1提高至600 mg·L−1的过程中,2组的TN去除率整体呈现出逐渐升高的趋势。其中,B组的TN去除率最高,平均去除率可达70%左右;A组的TN平均去除率约为60%。这说明反硝化菌的存在有利于促进系统TN的去除。图3反映了3组反应器在脱氮过程中的总氮负荷率和总氮去除效率(NRR)的变化。在第I阶段(0~54 d),在相同的NLR下,B组表现出最高的总氮去除效率,启动30 d后,B组的NRR达到了1.41 kg·(m3·d)−1,相对于A组(0.97 kg·(m3·d)−1)提高了31.2%。这同样说明反硝化菌的存在有利于TN的去除。XU等 [22]关于anammox污泥中anAOB和其他菌之间关系的研究结果也表明,反硝化菌Denitratisoma 的存在可提高anAOB活性。由此可推测,通过接种反硝化菌和anAOB可提高anAOB的活性。相对于A组和B组,C组的TN去除率最低(图2),仅有40%左右,且在后期没有升高的趋势,C组的NRR仅有0.48 kg·(m3·d)−1,低于空白组A组(50.5%)。这可能是由于硝化菌与anAOB存在底物竞争,不利于anAOB的富集增长,这与贾方旭等[8]的研究结果相似。因此,C组运行40 d后停止运行,第II和III阶段主要对比A组和B组的脱氮效果。

      在第II阶段(55~96 d),升高进水NH3-N和NO2-N质量浓度至500 mg·L−1,A组和B组的出水NH3-N和NO2-N波动较大。将HRT从8 h延长到9 h,同时升高回流比R为2,然而出水水质依然有波动,B组较A组波动较小;延长HRT为12 h后,出水水质有所好转,但90 d后依然有上升趋势。这充分证明,当进水总氮质量浓度升至1 000 mg·L−1后,导致系统脱氮效果变差,也说明过高的进水负荷抑制anAOB活性。李媛[23]也做了类似的研究,当进水总氮质量浓度由200 mg·L−1升高到600 mg·L−1、HRT由8 h缩短到6 h时,NRR迅速下降,NRR由1.2 kg·(m3·d)−1下降到1.03 kg·(m3·d)−1

      在第III阶段(97~116 d),为了恢复系统的脱氮性能,提高系统的稳定性,分别降低进水NH3-N和NO2-N质量浓度至400 mg·L−1,系统出水基本稳定,A组和B组的TN去除率稳定在80%以上,NRR维持在1.3 kg·(m3·d)−1左右。这说明通过降低进水负荷能够缓解对anAOB的抑制,有助于系统脱氮性能的恢复。

      图4反映了3组反应器脱氮过程中NO2-N去除量(△NO2-N)与NH3-N去除量(△NH3-N)的比值变化。A、B和C 3组反应器中NO2-N去除量与NH3-N去除量比例开始呈上升趋势,后续趋于稳定,基本保持在1.1左右。由厌氧氨氧化反应方程[24-25]可知,在厌氧氨氧化稳定运行时,NO2-N去除量与NH3-N去除量的理论比值为1.32。本研究的NO2-N去除量与NH3-N去除量的比值与理论值差异较小。其原因为:一是由于进水中含有一定量的溶解氧,会发生亚硝化和硝化作用,导致少量NH3-N转化为NO2-N或者NO3-N;二是菌群在富集过程中可能会释放氧化剂[26]。有研究表明,在低浓度厌氧氨氧化菌培养条件下,系统由于菌群浓度降低会产生氧化剂(超氧化物或羟基自由基),导致中NH3-N的消耗量增高[27]。B组的NO2-N去除量与NH3-N去除量比例在20 d后基本保持稳定,而A组在30 d后才趋于稳定,C组持续表现出较大波动。这充分说明反硝化菌的存在有利于anammox的启动,使anammox在最短的时间内在反应器内起主导作用,而硝化菌与anAOB存在底物竞争,从而导致C组NO2-N去除量与NH3-N去除量比例持续处于较低水平,并且有较大波动,对于anammox的启动具有抑制作用。

      游离氨(FA)和游离亚硝酸(FNA)的质量浓度对于anammox过程具有很大的影响[20]。为了评估FNA和FA对anammox过程的影响,本研究计算了A组和B组anammox过程的FA和FNA,探究高负荷进水条件下anammox受抑制的机理。图5反映了A组和B组脱氮过程中FA和FNA的变化。A组和B组在整个anammox脱氮过程中FA的质量浓度低于30 mg·L−1。已有研究[22]表明,控制FA的质量浓度低于50 mg·L−1对于anammox没有抑制作用。而在第II阶段,FNA的质量浓度已经达到0.05 mg·L−1以上,甚至超过了0.1 mg·L−1。anammox过程FNA质量浓度超过0.05 mg·L−1对于anAOB具有明显的抑制作用[19, 28]。这充分说明,当进水NO2-N质量浓度达到500 mg·L−1时,会导致FNA的质量浓度升高,当FNA的质量浓度超过0.05 mg·L−1时,会抑制anAOB的活性。通过降低进水NO2-N浓度,可使FNA低于0.05 mg·L−1,进而使系统逐渐恢复。

    • 为了进一部分解析A组和B组2种启动方式对anammox启动的差异以及氮素转化的规律,通过对启动30 d后A组和B组的进出水氮素指标核算系统的氮素转化,结果如图6所示。在进水NH3-N为154.3 mg·L−1,在NO2-N为155.0 mg·L−1的条件下,A组的总氮去除率达到52.2%,B组的总氮去除率达到76.2%,2组的总氮去除均是通过anammox实现的,B组比A组提高了24%。这充分说明,反硝化菌的存在有利于提高anAOB的活性。此结果与已有的研究结果一致[20]。此外,A组有30.5 mg·L−1的NH3-N被氨氧化菌氧化成NO2-N,同时有23.3 mg·L−1NO2-N被亚硝酸盐氧化菌氧化成了NO3-N。而B组中有仅有8.7 mg·L−1的NH3-N被氨氧化菌氧化成NO2-N,0.2 mg·L−1NO2-N被亚硝酸盐氧化菌氧化成了NO3-N,硝化反应的占比远低于anammox。该结果说明,B组可为anAOB提供较好的启动环境,更大程度的避免硝化菌等其他杂菌的影响,使anAOB最短的时间在反应器内起主导作用,实现快速启动。

    • 反应器anammox的启动过程是anAOB富集的过程。为了进一部分解析A组和B组接种方式对anAOB菌群丰度的影响,将A组和B组启动30 d后,取样进行高通量测序。细菌种群在属水平上的相对丰度如图7所示。2组反应器中主要的菌属为Candidatus Kuenenia, OLB13Denitratisoma。其中Candidatus Kuenenia是anAOB,在A组中的丰度占比为19.8%,在B组中的丰度占比为28.1%,相对于A组提高了41%。这说明B组的接种方式有利于anAOB菌群丰度的提升,从而促进anAOB的活性。这也充分印证了在第2.1节中的推测。Denitratisoma是常见的反硝化菌属[29],在A组和B组中的丰度占比分别为7.3%和12.6%。ZHANG等[30]的研究表明,Candidatus Kuenenia 的相对丰度与Denitratisoma 的相对丰度趋势具有一定的正相关性,说明 Candidatus KueneniaDenitratisoma 有很强的正相互作用,侧面验证了Denitratisoma的存在有利于体现Candidatus Kuenenia的活性。OLB13属于厌氧菌,是厌氧消化的核心微生物种群之一[31-32]。已有研究[12]表明,脱氮反应系统中OLB13Denitratisoma的存在对于Candidatus Kuenenia 的活性表达具有积极作用。因此,通过反硝化菌和anAOB的同时接种可以为anAOB提供一种较好的增殖环境,从而有利于提高anAOB丰度,促进反应器anammox脱氮效率的提升。

    • 1)向反应器中投加5 000 mg·L−1反硝化污泥(以MLSS计)和500 mg·L−1 anammox污泥(以MLSS计)进行接种,可以实现anammox的快速启动。启动30 d以后,总氮去除负荷可达1.41 kg·(m3·d)−1以上。

      2)进水NO2-N质量浓度达到500 mg·L−1时,会导致FNA质量浓度超过0.05 mg·L−1,从而严重影响anAOB的活性,进而导致反应器出水水质波动;通过降低进水NO2-N质量浓度可以使系统恢复。

      3)本研究所用的脱氮系统中,主导anammox的anAOB为Candaditue Kuenenia,与单独接种anammox污泥相比,接种反硝化污泥和anammox污泥可使Candaditue Kuenenia的丰度提高40.0%,从而使反应器脱氮效率提高了31.2%。

    参考文献 (32)

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