本实验在距滇池东岸100 m(纬度24°51′N，经度102°47′E，海拔1 888 m)的实验基地开展。处理系统为1个表面积为8.6 m²(3.2 m×2.7 m×1.7 m)的曝气塘和5个表面积为12 m²(24 m×0.5 m×0.6 m)的浮萍塘，曝气塘底部放置功率为0.75 kW的潜水曝气装置(上海艺巨，中国)和功率为1.1 kW的潜水抽水泵(重庆恒格尔，中国)，抽水泵的出水端与浮萍塘进水端通过管道连接，浮萍塘的出水端有高0.5 m的排水口。

本实验共设置预曝气时长分别为0、0.5、1、2和4 h的5个中试联合系统(实验处理组)，5个联合系统分别对应5个浮萍塘，所有浮萍塘的浮萍(Lemna japonica)初始覆盖密度设置为550 g·m⁻²(以鲜质量计)。实验过程中，每4 d定量采集并打捞多余浮萍，确保打捞后塘中剩余浮萍的覆盖密度恒定为550 g·m⁻²。所有浮萍塘的有效水深为0.5 m，蓄水量为6 m³，进水量为1 m³·d⁻¹，每2 d进水1次，曝气塘的有效水深为1.4 m，蓄水量为12 m³。各处理组曝气塘和浮萍塘的水力停留时间(hydraulic retention time, HRT)见表1。进水(实验用水)来源于当地农村生活污水和农田排水的低浓度混合废水，实验期间，进水的平均TP、TN、氨氮、硝态氮、浊度分别为(1.26±0.50)、(13.16±3.96)、(13.05±3.59)、(0.55±0.27) mg·L⁻¹和(46.54±41.82) NTU。进水步骤如下：分别向曝气塘和0 h曝气时长处理组的浮萍塘泵入12 m³和2 m³实验用水，随即启动曝气塘中的曝气泵，分别在曝气0.5、1、2和4 h时，将曝气塘中处于曝气状态的2 m³实验用水泵入所对应处理组的浮萍塘中；与此同时，浮萍塘出水端的排水口自动同步排水，以维持浮萍塘水深0.5 m相对稳定。进水结束后，排空曝气塘中的剩余水体。本实验中所有处理系统按上述方法持续运行0.5 a (2019年5—11月)。

1)水样。进水过程中，当曝气时长在0.5、1、2和4 h时均测定曝气塘中DO及氧化还原电位(Eh)，每次进水结束后测定浮萍塘中部水体表层(水面以下10 cm)及底层(塘底以上10 cm)的DO和Eh，DO及Eh使用双通道多参数水质检测仪Multi 3420 (WTW，德国)进行原位测定；运行期间每4 d采集1次浮萍塘进出水水样，水样采集后保存在500 mL聚乙烯采样瓶中，放入带有冰块的保温箱，当天运回实验室完成水质指标测定。其中TN、TP、氨氮和硝态氮浓度分别采用过硫酸钾氧化紫外分光光度法、钼酸铵分光光度法、纳氏试剂分光光度法和紫外分光光度法测定(国家环境保护总局，2002)；浊度采用WGZ-1A浊度仪(上海昕瑞，中国)测定；pH采用pHS-25型酸度计(上海雷磁，中国)测定。

污染物去除率按式(1)计算。

式中：$ \eta $为去除率；C₀为进水浓度，mg·L⁻¹；C为出水浓度，mg·L⁻¹。

2)浮萍样。为实现浮萍的定量采样和打捞，每次采样都用6个内面积为0.1 m²的取样框均匀对称地放置到每个浮萍塘表面，捞取6个取样框内的鲜浮萍之后，用脱水机脱水2 min后称重，根据质量计算出各塘内当前鲜浮萍的覆盖密度(g·m⁻²)，同时测算出需要捞取的多余浮萍的质量和面积并进行打捞，从而控制覆盖密度保持恒定为550 g·m⁻²。每次采样后留取约120 g鲜浮萍60 ℃过夜烘干并称质量。

浮萍含水率及干物质生长速率分别按式(2)和式(3)计算。

式中：W为含水率；F为浮萍鲜质量，g；D为浮萍干物质质量，g。

式中：V为干物质生长速率，g·(m²·d)⁻¹；W₂为本次干物质质量，g；W₁为上次打捞后浮萍塘剩余的干物质质量，g；S为水体表面积，m²；t为打捞周期，d。

数据使用SPSS 23.0进行配对样品T检验分析，取95%的置信度水平分析处理组间的显著性差异，并使用Microsoft Excel 2010进行制图。

1)对曝气塘水体DO、Eh及pH的影响。由图1(a)可知，随着曝气时长增加，曝气塘水体中DO不断升高，且各组间均有显著差异。其中，当曝气时长为0.5、1、2和4 h时，DO分别为4.47、5.41、6.47和7.45 mg·L⁻¹。同时，由图1(b)可知，各曝气时长下的Eh均为负值，并随着曝气时长的增加而升高。其中，曝气时长0.5 h时Eh均值最小，为−187.77 mV；曝气4 h时均值最大，为−111.04 mV。Eh在曝气时长0.5、1和2 h间存在显著差异，而在2 h和4 h间无显著差异。此外，由图1(c)可知，所有曝气时长下水体pH均大于7.8，并随着曝气时长的增加而升高。其中，曝气时长为0.5 h时，水体平均pH最低，为7.8；曝气时长为4 h时，水体平均pH最高，为8.4；且各曝气时长间的pH均有显著差异。以上结果表明，曝气有利于提高进水水体DO、Eh和pH，且曝气时间越长，DO、Eh和pH越高。

2)对曝气塘污染物浓度及去除的影响。由表2的数据可知，曝气塘中曝气时长0.5、1、2和4 h处理组中曝气塘出水TN浓度均无显著差异，但均显著低于未曝气时的浓度。这表明曝气处理能促进TN的去除，但不同曝气时长对TN去除的影响较小，并且TN去除率均较低，约为6%左右(图2)。而对于曝气塘出水硝态氮浓度(表2)，其结果与TN浓度类似，曝气时长为0.5、1、2和4 h的处理组显著低于0 h处理组。这表明曝气处理同样能促进硝态氮的去除，并且随曝气时间的增加，硝态氮浓度呈现升高趋势。其中，曝气时长为1、2和4 h的处理组中硝态氮的浓度显著高于曝气时长为0.5 h的处理组。这表明曝气时长增加不利于硝态氮的去除，这可能与长曝气时间下水体DO较高(图1(a))，好氧硝化过程增强，而厌氧反硝化过程受到抑制有关^[20]。同时，所有曝气时长(0、0.5、1、2及4 h)之间的TP浓度均无显著差异(表2)，而且TP去除率最高仅有2%左右(图2)，表明曝气处理对TP的去除无显著促进作用。然而，曝气处理对浊度的降低却极为有效。其中，曝气时长0.5、1、2及4 h的浊度均显著低于0 h，且0.5、1和2 h的浊度显著低于4 h(表2)，表明不同曝气时长对浊度的影响不同。从去除率看(图2)，曝气时长0.5 h对浊度的去除率最高为56.59%，随着曝气时间增加，去除率有逐渐降低的趋势；在曝气时长4 h时，去除率下降为41.91%。这一结果可能与曝气过程中水体氧化还原性和微生物的生长有关，曝气前的实验用水因长期处于厌氧状态，会产生大量还原性黑色物质(FeS、MnS等)，使水体变成浊度较高的黑臭水体^[21]。而短暂的曝气(0.5 h)会使得水体中的黑色物质被氧化，浊度迅速降低(表2)，随着曝气时间增加，水体中的微生物大量繁殖，使得浊度升高，去除率下降。

1)对浮萍塘水体DO、Eh及pH的影响。由图3(a)可见，DO在进水经不同曝气时长处理的浮萍塘间均存在显著差异，并随曝气时长增加而上升。其中，DO在进水未经曝气处理(曝气时长为0 h)的浮萍塘中均值仅有0.39 mg·L⁻¹，而曝气0.5 h后均值迅速升至2.06 mg·L⁻¹。此后，随曝气时长增加上升趋势变缓，曝气4 h时仅达到3.13 mg·L⁻¹。这表明通过对浮萍塘进水进行曝气处理可通过提高进水(即曝气塘水体)DO(图1(a))增加浮萍塘水体DO。但与进水DO相比，浮萍塘水体DO随曝气时长增加而提升的幅度较小，当曝气时长大于0.5 h后，延长曝气时长对浮萍塘水体的增氧效果有限。此外，由图3(b)可知，Eh在所有处理的浮萍塘中均为负值，其中，在进水未经曝气处理(曝气时长为0 h)的浮萍塘中均值最小(−258.78 mV)，显著低于其他处理；而在曝气时长0.5、1和2 h间(−120.00 mV左右)无显著差异，但曝气时长0.5和2 h则显著低于曝气时长4 h(−103.31 mV)。上述结果表明，曝气处理有利于提高浮萍塘水体Eh，且随曝气时长增加，Eh呈现一定的上升趋势，但并不明显。此外，图3(c)表明，浮萍塘水体pH并未随曝气时长的增加呈现出显著的变化趋势，相对而言，经曝气时长4 h处理的水体pH(7.95)显著高于其他处理，而经曝气时长1 h处理的水体pH(7.85)显著低于其他处理。

2)对浮萍生长的影响。图4表明，与进水未经曝气处理(曝气时长0 h)的浮萍塘相比，进水经曝气处理(曝气时长0.5、1、2和4 h)的浮萍塘中浮萍生长速率更高，表明曝气处理能促进浮萍生长。其中，随着曝气时长的增加，浮萍的生长速率呈先上升后下降的变化趋势；在曝气时长2 h下的平均生长速率最高(8.00 g·(m²·d)⁻¹)，显著高于其他曝气时长下的平均生长速率，也高于前期无曝气处理的研究结果^[18]。这表明在本实验条件下，浮萍生长最优曝气时长为2 h。此外，由图4可进一步看出，在进水经曝气处理(曝气时长0.5、1、2和4 h)的浮萍塘中，浮萍的含水率显著低于未经曝气处理(曝气时长0 h)的浮萍塘。这表明曝气处理能降低浮萍含水率，提高浮萍的干物质含量，并且随着曝气时长的增加，浮萍的含水率呈现出缓慢下降的变化趋势。以上结果表明，不同曝气时长在影响浮萍生长的同时，也影响浮萍的生理状况。

3)对浮萍塘污染物出水浓度的影响。由表3可知，对于所有污染物的出水浓度，经曝气处理(0.5、1、2和4 h)的浮萍塘均显著低于未经曝气处理(0 h)的浮萍塘。此结果表明，曝气处理有利于所有污染物的去除。然而，在经曝气处理的浮萍塘间出水污染物浓度的差异相对较小，而且不同污染物的差异情况不同。对于TN和浊度，曝气时长1、2和4 h处理组的数值显著低于0 h处理组，最低均值分别出现在曝气时长1 h(4.98 mg·L⁻¹)和4 h(2.83 NTU)；对于氨氮，曝气时长4 h的出水浓度显著最低，其平均出水浓度为3.68 mg·L⁻¹；对于硝态氮，随曝气时长的增加，出水浓度呈现升高趋势，在曝气时长0 h时有最小平均出水浓度(0.14 mg·L⁻¹)，在曝气时长4 h时有最大平均出水浓度(1.36 mg·L⁻¹)，所有经曝气处理的浮萍塘均显著高于未经曝气处理的浮萍塘；对于TP，曝气时长4 h的出水浓度在所有处理组中最低(0.23 mg·L⁻¹)。

利用曝气塘进水(最初实验用水)及浮萍塘出水计算和比较不同曝气时长下曝气塘-浮萍塘联合系统的污染物去除率，以此评估曝气时长对联合系统污染物去除效果的影响并探寻经济有效的最佳曝气时长，结果如图5所示。由图5可知，所有污染物的去除率均随曝气时长的增加而先迅速上升后趋于平缓；在曝气时长为0 h的联合系统中，TN、氨氮、TP和浊度的去除率分别为37.42%、36.18%、51.09%和78.40%；进行0.5 h曝气处理后，上述污染物的去除率迅速上升，分别达到53.51%、58.93%、73.05%和85.11%；1 h曝气处理后，除TP外，其他污染去除率也有显著上升，但幅度变小，TN、氨氮和浊度的去除率分别上升至58.42%、61.89%和89.90%；此后，随曝气时长进一步增加(2 h和4 h)，除TP去除率有一定升高，并在曝气时长4 h时达到最大值(81.44%)外，其他污染物(包括TN、氨氮和浊度)的去除率均未明显提升，与曝气时长1 h相比无显著差异，这表明曝气时长对这些污染物去除的促进作用在曝气1 h左右就已基本完成。可见，尽管增加曝气时长能显著提高进水和浮萍塘水体DO(分别如图1(a)和图3(a))和Eh(分别如图1(b)和图3(b))，但并不能持续促进大多数污染物的去除，也不能持续促进浮萍的生长(如图4)。同时，尽管浮萍在曝气时长2 h时出现最大值8.00 g·(m²·d)⁻¹，但与曝气时长1 h的7.36 g·(m²·d)⁻¹相比并不突出，然而曝气成本却增加2倍，因此，综合考虑污染物去除、浮萍生长及曝气成本，建议最优曝气时长为0.5~1 h。此时，与未曝气处理组相比，浮萍塘的DO提高了1.68~2.02 mg·L⁻¹；TN、氨氮、TP和浊度的去除率分别提高了16.09%~21.00%、22.75%~25.71%、21.67%~21.96%和6.71%~11.50%。

本研究中发现，曝气处理在提高进水水体DO的同时(图1(a))，也能增加水体的pH(图1(c))，且DO和pH之间呈显著正相关关系(P<0.05)，这一结果与已有文献报道^[22-23]的结果一致。这可能与水体中有机物的分解有关：在DO较低时，有机物的分解以厌氧发酵产有机酸为主，使水体pH较低；随DO的提高，有机物的分解转变为以好氧分解产CO₂为主^[24]，因CO₂酸性较有机酸弱，导致pH逐渐升高。然而，相对DO来说，pH升高幅度较小，仅从曝气时长0 h的7.86升高至曝气时长4 h的8.43(图1(c))，因此，pH对污染物的去除影响有限。

在浮萍生产方面，曝气处理可显著提高浮萍的生长速率(图4)，推测可能与曝气处理增加水体CO₂^[25]和O₂(即DO)含量有关(图3(a))。CO₂作为重要的光合作用底物，可促进浮萍光合作用和生长，而O₂含量的增加有利于改善浮萍根系植物促生菌的生长状况，进而促进浮萍生长。有研究结果^[26]表明，浮萍根系普遍含有大量对其生长有重要作用的植物促生菌，这些促生菌大多属于好氧微生物，因而易受O₂含量影响。更多浮萍生物质的收获具有重要意义：一方面，浮萍生物质富含淀粉、蛋白及黄酮等高附加值成分^{[2, 5]}，可通过微生物发酵或热化学液化过程转化为生物燃料^{[6, 27-28]}；另一方面，也可作为蛋白食物/饲料原料^{[10, 29]}和农业肥料^[30]，甚至通过提取药用成分，用于治疗心脑血管疾病等^[31]，实现污水处理、碳氮磷资源回收及生物质利用的产业链循环。浮萍可资源化利用的这一突出特点是其相较其他水生植物的最大优势。此外，浮萍在生物质收获方面也比其他大型水生植物更容易。大型水生植物(水葫芦)由于个体大、根系长并深扎土壤、个体之间相互缠绕等，采收之前需要进行切割等前处理，而浮萍较小的个体及漂浮于水体表面的特点无需进行切割等前处理操作，可直接通过刮赶、真空吸取和过滤等方式打捞^[32-33]，更易实现机械化、自动化操作和规模化生产。

在污染物去除方面，联合系统的氮磷去除主要以浮萍塘为主(图5)。有研究结果^{[12, 34]}表明，浮萍塘中氮的去除途径主要包括浮萍吸收、微生物硝化反硝化作用、氨挥发以及沉降。其中，在pH中性及低氨氮浓度的水体中，挥发和沉降作用对氮的去除贡献极小，浮萍吸收和微生物的硝化反硝化被认为是浮萍塘中氮去除的主要途径^{[18, 35]}。本研究中的pH在8左右(图3(c))，进水氨氮质量浓度在11 mg·L⁻¹左右。因此，可认为氮的去除主要通过浮萍生长吸收和硝化反硝化作用2种途径实现，而曝气处理不仅可以促进浮萍的生长吸收(图4)，还会通过改善水体DO(图3(a))促进硝化反硝化细菌的生长和活性，进而促进氮素的去除。曝气时长对氮素去除的促进作用主要体现在初始的1 h以内。其中，0.5 h内通过同时促进浮萍生长及硝化反硝化作用实现，而0.5 h后则仅通过促进硝化反硝化作用而实现，曝气时长高于1 h后对氮素污染物去除的影响较小(图5)。与去除氮素不同，浮萍塘去除磷的途径相对单一，主要包括浮萍吸收和微生物吸收沉降2个途径^[12]。有研究表明，浮萍对磷的去除效果优于其他大部分水生植物^[7]。对于未经曝气处理的浮萍塘，浮萍吸收是磷去除的主要途径^[2]，然而，经曝气处理的浮萍塘，情况可能有所不同。有研究结果^[36-37]表明，聚磷微生物对磷的吸收和聚合作用是一个好氧过程，DO越高，聚磷微生物除磷效果越好。因此，曝气处理可通过增加水体DO，促进聚磷微生物对磷的吸收和去除。本研究中，曝气时长对磷的去除促进作用主要体现在前0.5 h以内，主要通过促进浮萍生长得以实现(图4)；而曝气时长为1 h时反而不利于磷的去除；在曝气时长高于1 h后，曝气可通过强化聚磷以促进磷的去除，但效果有限(图5)。

1)曝气处理能显著提高曝气塘及浮萍塘水体中的DO和Eh，且DO和Eh随曝气时长的增加而上升。

2)曝气处理也能显著促进浮萍生长及污染物去除，但促进效果并未简单地随曝气时长的增加而提高。

3)综合考虑污染物去除、浮萍生长及曝气成本，建议曝气时长不宜高于1 h。推荐的曝气时长以0.5~1 h为佳，此时浮萍塘DO提高了1.68~2.02 mg·L⁻¹，TN、氨氮、TP和浊度的去除率分别提高了16.09%~21.00%、22.75%~25.71%、21.67%~21.96%和6.71%~11.50%。