农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征

詹俊, 李现瑾, 韩云平, 徐素, 郭雪松. 农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征[J]. 环境工程学报, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157
引用本文: 詹俊, 李现瑾, 韩云平, 徐素, 郭雪松. 农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征[J]. 环境工程学报, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157
ZHAN Jun, LI Xianjin, HAN Yunping, XU Su, GUO Xuesong. Characterization of the potential pathogenic bacteria distribution in rural decentralized wastewater treatment facilities[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157
Citation: ZHAN Jun, LI Xianjin, HAN Yunping, XU Su, GUO Xuesong. Characterization of the potential pathogenic bacteria distribution in rural decentralized wastewater treatment facilities[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157

农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征

    作者简介: 詹俊(1997—),男,硕士研究生。研究方向:农村环境潜在致病微生物迁移分布规律。E-mail:zhanjun19@mails.ucas.ac.cn
    通讯作者: 韩云平(1976—),男,博士,副研究员。研究方向:水污染防治理论与技术。E-mail:yphan@rcees.ac.cn
  • 基金项目:
    国家自然科学基金重大项目(52091545);环境模拟与污染控制国家重点联合实验室(中国科学院生态环境研究中心)专项基金(20Z01ESPCR)
  • 中图分类号: X503.1

Characterization of the potential pathogenic bacteria distribution in rural decentralized wastewater treatment facilities

    Corresponding author: HAN Yunping, yphan@rcees.ac.cn
  • 摘要: 污水是病原微生物传播的重要介质之一。目前我国大多数农村地区生活污水经生化处理后,极少进行消毒就直接排放至自然水体,这是否会造成农村地区污水中病原微生物的传播尚不明确。为此,以未开消毒设施的一体化污水净化槽为研究对象,在其稳定运行阶段,分析了不同处理单元、尤其是出水中细菌种群及潜在致病性细菌种类的特征。结果表明,与进水相比,净化槽各单元均包含一定量的潜在致病细菌,尤其是出水中,检出了20种潜在致病细菌,以FlavobacteriumPseudomonas等为主。其中部分潜在致病菌随着污水处理流程其丰度呈现上升趋势。例如,AeromonasKlebsiellaArcobacterBacteroides在进水中几乎未检出,其相对丰度分别为0%、0%、0.01%和0.21%,但其在出水中检出的相对丰度则为1.26%、0.70%、0.24%和2.63%。以上研究结果初步表明,在农村地区生活污水生物处理设施各工段中,均存在一定的潜在致病性微生物;尤其值得注意的是,在不进行消毒的状态下,出水中也包含多种潜在致病性微生物,其排放对周边环境及人体健康可能存在一定影响。本研究结果可为后续村镇小型污水处理设施的健康风险评估提供参考。
  • 催化燃烧法是目前处理挥发性有机物(VOCs)常用的有效方法之一[1-2]。它通过降低反应所需活化能,使反应时间缩短、转化率提高、降低反应所需温度,同时较低的反应温度也使得气体在转化过程中难以生成二次污染物,对环境更为友好,因此,针对催化燃烧的实际应用的研究具有重要的意义。工业上常用的催化剂有2种:一种是颗粒状催化剂;一种是整体式催化剂。颗粒状催化剂在工业上应用时总会发生床层堵塞、颗粒破裂等问题,并且传热效果、热稳定性等性能都比较差,学者们便从这几方面着手开展工作,研发出了稳定性好、耐压耐磨、传热效果好、方便装填的整体式催化剂[3-4]。近些年,整体式催化剂由于其良好的特性在汽车尾气净化等工业领域有了较为广泛的应用,在环保领域有着举足轻重的地位[3]

    在催化燃烧过程中,传热、传质、流动是相当复杂的问题,对于大多数有实际意义的传热、传质、流动问题,都无法得到实际的解决[5]。电脑的发展以及模拟软件的开发为这一难题提供了另一条思路——通过人为控制条件对反应进行一系列模拟,从而观察反应的动态规律。目前使用最多的模拟软件是Fluent,它具有多样的物理模型,可以适用于环保、能源、航空航天等多个领域;同时它还具备先进的求解器和求解方法,通过条件的合理定义,可以得到准确的仿真结果;其强大的后处理功能更能使结果可视化、简单直观地呈现出来。李欣婷[6]对微型圆管燃烧器内二甲醚的催化燃烧进行了数值模拟,进一步验证了催化剂对二甲醚的吸附能力大于氧气,适当增加氧气含量有利于催化反应正向进行;曾文[7]对在均质压燃HCCI发动机中的催化燃烧进行了模拟,创建了单维和多维模型,并详细分析了催化燃烧对HCCI发动机缸内温度场及CO、HC、NO浓度场的影响;王娟等[8-9]对在整体式催化剂中甲苯的蓄热燃烧和催化燃烧进行了数值模拟,从催化剂孔道水平考察了2种方式的反应特征和适用范围。

    目前,由于缺少挥发性有机物在催化剂表面的反应机理,并且绝大部分模拟仅是在催化剂单孔道层面进行,因而,缺少针对整体式催化剂催化有机物的研究工作。本研究以甲苯为VOCs的代表物,采用一步反应机理,着眼于整个催化燃烧系统中甲苯转化率、速度变化、当量比和温度分布等因素的研究;并利用多孔介质模型模拟催化燃烧,进一步探索整体式催化反应系统内甲苯催化燃烧的规律分布,再使用Fluent软件进行数值模拟,进而对其燃烧特性进行探究,以便为实际应用提供参考。

    图1为本研究所采用的甲苯催化燃烧反应器三维物理模型。燃烧器入口直径为20 mm,筒体直径为80 mm,总长度为1 267 mm,从558 mm处布置长度为150 mm的整体式催化剂,流动模型选择湍流模型,催化剂段选取多孔介质模型,催化剂床层段流动为层流。燃烧模型选择组分运输模型,因反应放热,高温下辐射作用不可忽略,故利用辐射模型。

    图 1  甲苯催化燃烧装置网格图
    Figure 1.  Mesh diagram of toluene catalytic combustion unit

    在数值模拟中,对所选择模型[10-12]进行7种假定。

    1)反应器内气体流动及热传递在圆柱横截面周方向各个参数相等。

    2)反应器壁面选取绝热壁面,与外界无热量交换,多孔介质区为辐射灰体。

    3)温度梯度引起的质量扩散和浓度梯度引起的热传递忽略不计。

    4)重力的影响忽略不计。

    5)所有气体都视为不可压缩流体。

    6)模拟催化剂的多孔介质视为均一介质。

    7)泡沫陶瓷区域气固温度相等。

    VERWIN[13]研究发现,当泡沫陶瓷换热率数量级在105 W·(m3·K)−1之上时,充当骨架的固体和流体可作为均一介质对待。泡沫陶瓷的体积换热系数都比较高,FU[14]分别对10 PPI和20 PPI的泡沫陶瓷的体积换热系数进行了研究,结果表明,气流速度为0.08 ~ 5.56 m·s−1时,测得的体积换热系数为100~1 800 kW·(m3·K)−1。故假设局部热平衡是合理的。

    在实验过程中计算参数设置如下。

    1)反应器入口为velocity-inlet,流速的变化范围在0.16~4 m·s−1

    2)反应器出口设定为pressure-outlet。

    3)反应器入口温度设为300 K,其混合气体的热容量(C)、黏度(η)等参数根据各组分特性,采用质量加权平均来计算。

    4)多孔介质区材料选择泡沫陶瓷氧化铝,在多孔方程中选用物理速度以实现流体在多孔介质区的加速过程,为了简化计算,设置物性为常数,取值如下:孔隙率0.841;密度650 kg·m−3、热容824.7 J·(kg·K)−1、热导率4.23 W·(m·K)−1、衰减系数1 399、散射系数1 098、吸收系数301;多孔介质区阻力系数(黏性阻力系数和惯性阻力系数)分别按照吕兆华[15]研究得到的公式进行计算。

    5)本研究采用甲苯在Pt表面反应的一步反应机理[16],具体参数设置:指前因子A 1.26×107 s−1,活化能Ea 92.6 kJ·mol−1

    对所画网格进行无关性验证[17]。网格数量在模拟中起着至关重要的作用,网格精度不够,不能够满足计算需求;网格数量太大,又会增加计算量。无关性验证有助于在网格加密程度与计算精度之间找到一个平衡点。本研究通过对网格进行1次加密和2次加密来探究网格数量对模拟计算精度的影响,具体模拟结果如表1所示。

    表 1  网格无关性验证数据对比
    Table 1.  Comparison of grid-independent validation data
    加密情况 标准差 面积加权均匀性指数
    不加密 0.273 0.882
    加密1次 0.233 0.909
    加密2次 0.233 0.909
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    表1可见,当网格加密1次后再进行加密对系统内流场各项分布参数几乎没有影响,故本研究所有计算都是在对所画网格进行1次加密之后进行的。

    在入口流速为2 m·s−1的条件下,改变甲苯/空气当量比,分别对不同当量比条件下的反应进行数值模拟计算,考察甲苯/空气当量比对甲苯转化率的影响,结果如图2所示。

    图 2  甲苯转化率随入口当量比的变化
    Figure 2.  Change of toluene conversion rate with inlet equivalent ratio

    甲苯转化率主要根据式(1)进行计算。

    η=xxx×100% (1)

    式中:η为甲苯转化率;x为入口处甲苯质量分数;x为出口处甲苯质量分数。

    图2可以看出,入口流速保持一定,增大入口甲苯/空气当量比,甲苯转化率由原来的基本保持不变到不断下降;当量比较低时,甲苯转化率随着入口当量比的增加基本没有下降。当量比由0.84增加到1.04时,甲苯经催化剂催化燃烧,其转化率由97.08%下降至85.79%;当量比由1.04增加到1.25时,其转化率由85.79%下降至77.11%,以基本一致的水平下降。说明当入口气速一定时,混合气体与孔道接触时间一定,反应去除的甲苯量也应该是一定的,但随着反应放热,混和气体在孔道内会实现加速,孔道长度一定,随着速度的增加,混合气体与催化剂接触时间缩短,催化反应去除的甲苯量也会相应减小。

    CHI等[18]的研究详细介绍了动力学模型和VOCs氧化机制;HOSSEINI等[19]实验研究发现,甲苯在Pd-Au/TiO2金属物催化剂表面发生的氧化反应遵循L-H模型,即氧分子和甲苯分子在催化剂表面竞争吸附。由罗孟飞等[16, 20]根据L-H理论探究出的甲苯在铂上的反应动力学可知,方程r=kc/(l+bc)中的b为反应物在催化剂表面吸附的平衡常数,b值大小反映了反应物在催化剂表面吸附的易难程度,可以看出甲苯在铂催化剂表面吸附较为容易。通过控制甲苯入口浓度来调整甲苯和氧气的当量比,可以看出,在贫燃条件下,催化段转化率几乎为100%;在富燃条件下,催化段转化率下降,但热力燃烧甲苯转化率上升,由此可知,甲苯在铂上的吸附能力要强于氧气,故适当增加氧气的量有利于催化反应继续进行。

    在本次模拟中,将壁面设置为绝热,并通过分区设置反应,在多孔介质区进行以铂为催化剂的催化反应,在多孔介质区后的筒体中进行热力燃烧,当入口当量比为1.04时,催化剂床层出口甲苯转化率为85.79%,反应器出口甲苯转化率为96%,其温度分布和甲苯浓度分布见图3。由图3可以看出,入口当量比为0.63时,高温区出现在催化床层段,入口当量比为1.04时,高温区主要集中在催化床层后,并且高温区整整差了1 000 K,催化反应放热达到了甲苯空间热力燃烧的温度,因此,在反应器后端发生了热力燃烧,从而将甲苯完全转化,说明甲苯的催化燃烧本身就是一个催化燃烧和热力燃烧相互掺杂的过程。在低温下,只发生甲苯的催化燃烧,随着温度的升高,热力燃烧和催化燃烧共同作用,这也说明,当燃烧温度达到一定高度后,一定范围内的甲苯废气均能取得一个很好的转化效率,说明催化燃烧技术具有很强的浓度弹性,非常适用于在真实工业生产中非恒定浓度的有机废气的净化。而且,催化燃烧和热力燃烧共同作用也可以使系统内温度大大降低,更为有效地减少了二次污染物的产生和氮氧化物的产生。

    图 3  不同入口当量比的浓度和温度云图
    Figure 3.  Concentration and temperature clouds of different inlet equivalent ratios

    温度是影响燃烧的一个重要因素,研究中考察了当催化燃烧反应发生时,反应器内温度和甲苯转化率的变化情况,在给定温度625 K,混合气体入口当量比为1、入口速度为4 m·s−1的情况下,反应器内温度分布云图如图4所示,高温区主要集中在反应器后端。在同样的条件下,仅改变混合气体入口气速,以分别考察燃烧温度对甲苯转化率的影响,结果如图5所示。

    图 4  入口流速为4 m·s-1时反应器中温度变化
    Figure 4.  Temperature variation in reactor at 4 m·s-1 inlet velocity
    图 5  燃烧温度对转化率的影响
    Figure 5.  Effect of burning temperature on percent conversion

    图5中可以看出,给定燃烧系统一个温度,不同入口气速下,甲苯的转化率均有很大提高;改变燃烧温度,不同流速下的甲苯的转化率也均有所提高,说明燃烧温度是控制甲苯转化率的一个重要因素。入口流速为4 m·s−1,入口当量比为1时,催化剂床层出口甲苯转化率随着温度的上升变化不大,说明流速过快导致甲苯和催化剂之间接触时间过短,此时温度已经不是影响反应的主要因素;但随着入口流速的减小,催化剂床层甲苯达到最高转化率时的温度就越低,但是在反应器出口,几乎在每一种工况条件下,甲苯的转化率都已经达到了100%。这是因为反应放热,在反应器筒体后腔同样发生了热力燃烧,从而将甲苯完全转化。这也说明温度是影响反应的一个重要因素。

    改变入口流速会导致反应速率和滞留时间发生变化[21],从微观角度来讲,它们都是影响反应进行的重要因素。将入口条件固定如下:当量比为1,温度为300 K,入口流速为0.16~4 m·s−1,甲苯转化率随入口流速的变化情况如图6所示。

    图 6  转化率随入口流速的变化
    Figure 6.  Change of conversion with inlet flow rate

    图6可以看出:随着入口流速的增加,入口流速小于1 m·s−1时,催化床层出口和反应器出口均保持几乎100%的转化率,入口流速大于1 m·s−1后,催化床层出口转化率逐渐降低;而反应器出口甲苯转化率很高且保持不变,产生这一现象的原因是混合气体经催化反应后蓄积的热量足够支撑甲苯进行热力燃烧。

    由催化反应动力学可知,反应速率由物质扩散速率控制,当催化剂长度一定时,入口流速越大,混合气体在孔道内的滞留时间越短,要扩散到铂表面和其活性位点接触的难度就越大,部分甲苯和催化剂来不及充分接触就被气流带离,从而使得整个反应的进程变的缓慢;反之,混合气体因滞留时间长而能与表面有效位点充分地碰撞接触,从而使整个反应的效率提升。

    WANG等[22]通过对铂(Pt)催化甲烷的模拟研究得出,Pt催化剂上的均相反应主要对高、中进口速度下的均质燃烧产生负面影响,而在低速条件下表现出正面影响,与本研究模拟结果相同。

    图7是甲苯混合气体在反应器中的温度变化曲线。可以看出,中心线温度变化范围较大,其中有3个温度突变:第1个突变是从300 K升到625 K,这是为了使甲苯能够达到燃烧温度;第2个温度突变是从625 K上升到1 700 K左右,这是因为甲苯混合气体进入催化床层,发生了催化反应,燃烧反应放热,从而使得温度急剧升高;随之未反应的混和气体进入反应器筒体后腔,经过热量的蓄积,反应器内的温度已经完全能够支撑甲苯直接进行热力燃烧,故可继续放出大量热。

    图 7  中心线温度随入口流速的变化
    Figure 7.  variation of centerline temperature with inlet velocity

    图8是反应器不同位置的平均温度随入口流速的变化曲线。可以看出,当入口流速为1.5 m·s−1,在经过60 mm长的催化剂床层后温度已经基本不变。随着入口流速的升高,催化床层温度有所降低,但都在催化床层尾端有温度陡增的趋势。从图9可以看出,随着入口流速的降低,最高温度距离前移,可以看出入口流速越低,越有利于催化反应的发生。

    图 8  反应器不同位置平均温度随入口流速的变化
    Figure 8.  Variation of mean temperature at different positions of reactor with inlet flow velocity
    图 9  不同入口流速的温度云图
    Figure 9.  Temperature clouds at different inlet velocities

    在实际的工程应用中,往往在保证了处理效率的前提下,还要考虑能耗和运行费用问题。当燃烧温度足够高时,在一定入口流速范围内,均可获得很好的甲苯去除效果,因此,可以通过一些手段减少反应器与外界环境之间的换热,降低能量损失,从而促进反应器内催化燃烧和热力燃烧共同作用;同时也可说明催化燃烧技术可以用于气体风量发生波动的有机废气净化。

    1)在只改变甲苯入口当量比的情况下,甲苯的催化转化率随甲苯/空气当量比的增大呈现逐渐降低的趋势,这说明催化剂能处理的量是一定的,在甲苯的入口流速为2 m·s−1、燃烧温度为625 K,入口当量比不高于0.84时,甲苯催化转化率均可达到100%;在只改变入口流速的条件下,甲苯的催化转化率与流速呈正相关。当入口当量比为1,燃烧温度为625 K,入口流速不大于1 m·s−1时,甲苯催化转化率均可达到100%。

    2)燃烧温度是影响甲苯转化率的重要因素,催化剂可以有效地降低甲苯起燃温度。当燃烧温度大于625 K,甲苯的入口当量比小于1,入口流速小于2 m·s−1时,可保证甲苯转化率在96%以上。

    3)通过分段控制燃烧反应,发现贫燃条件有利于催化燃烧,富燃条件有利于引发热力燃烧,同时也可利用此结论,根据所处理废气浓度的波动范围,合理布置催化床层长度。

    4)甲苯混合气体在反应器中发生反应时,催化燃烧和热力燃烧共同起作用,因此,在实际反应器的设计中,要考虑对反应器采取一定的绝热措施,以减少反应器壁面与外界环境之间的换热。

  • 图 1  一体化污水净化槽装置示意图

    Figure 1.  Schematic diagram of the integrated Johkasou

    图 2  净化槽污水进、出水水质变化

    Figure 2.  Changes of water quality of the influent and effluent in the the Johkasou

    图 3  污水处理过程主要污染物去除效率变化

    Figure 3.  Changes in removal efficiency of key pollutants in wastewater treatment process

    图 4  污水处理过程和受纳水体中细菌相对在门水平的丰度变化

    Figure 4.  Changes in the relative abundance of bacteria at Phylum level during wastewater treatment and in receiving water

    图 5  污水处理过程和受纳水体中细菌在属水平的相对丰度变化

    Figure 5.  Changes in the relative abundance of bacteria at Genus level during wastewater treatment and in receiving water

    图 6  水处理过程中潜在致病菌相对丰度变化

    Figure 6.  Changes in the relative abundance of potential pathogenic bacteria during water treatment

    表 1  不同处理单元微生物群落丰度和多样性

    Table 1.  Microbial community abundance and diversity in different treatment units

    处理单元AceChao1覆盖率/%ShannonSimpson
    A11 252.211 025.0199.302.250.26
    A21 986.921 965.4898.934.130.15
    A32 396.722 404.3298.755.490.01
    A42 260.192 221.7598.955.010.02
    A51 910.351 841.8299.164.920.02
    A62 029.491 981.2798.685.060.03
    处理单元AceChao1覆盖率/%ShannonSimpson
    A11 252.211 025.0199.302.250.26
    A21 986.921 965.4898.934.130.15
    A32 396.722 404.3298.755.490.01
    A42 260.192 221.7598.955.010.02
    A51 910.351 841.8299.164.920.02
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-08-26
  • 录用日期:  2021-10-31
  • 刊出日期:  2021-12-10
詹俊, 李现瑾, 韩云平, 徐素, 郭雪松. 农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征[J]. 环境工程学报, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157
引用本文: 詹俊, 李现瑾, 韩云平, 徐素, 郭雪松. 农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征[J]. 环境工程学报, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157
ZHAN Jun, LI Xianjin, HAN Yunping, XU Su, GUO Xuesong. Characterization of the potential pathogenic bacteria distribution in rural decentralized wastewater treatment facilities[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157
Citation: ZHAN Jun, LI Xianjin, HAN Yunping, XU Su, GUO Xuesong. Characterization of the potential pathogenic bacteria distribution in rural decentralized wastewater treatment facilities[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2021, 15(12): 3924-3933. doi: 10.12030/j.cjee.202108157

农村分散式污水处理设施潜在致病细菌分布特征

    通讯作者: 韩云平(1976—),男,博士,副研究员。研究方向:水污染防治理论与技术。E-mail:yphan@rcees.ac.cn
    作者简介: 詹俊(1997—),男,硕士研究生。研究方向:农村环境潜在致病微生物迁移分布规律。E-mail:zhanjun19@mails.ucas.ac.cn
  • 1. 中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室,北京 100085
  • 2. 中国科学院大学,北京 100049
  • 3. 中车山东机车车辆有限公司,济南 250022
基金项目:
国家自然科学基金重大项目(52091545);环境模拟与污染控制国家重点联合实验室(中国科学院生态环境研究中心)专项基金(20Z01ESPCR)

摘要: 污水是病原微生物传播的重要介质之一。目前我国大多数农村地区生活污水经生化处理后,极少进行消毒就直接排放至自然水体,这是否会造成农村地区污水中病原微生物的传播尚不明确。为此,以未开消毒设施的一体化污水净化槽为研究对象,在其稳定运行阶段,分析了不同处理单元、尤其是出水中细菌种群及潜在致病性细菌种类的特征。结果表明,与进水相比,净化槽各单元均包含一定量的潜在致病细菌,尤其是出水中,检出了20种潜在致病细菌,以FlavobacteriumPseudomonas等为主。其中部分潜在致病菌随着污水处理流程其丰度呈现上升趋势。例如,AeromonasKlebsiellaArcobacterBacteroides在进水中几乎未检出,其相对丰度分别为0%、0%、0.01%和0.21%,但其在出水中检出的相对丰度则为1.26%、0.70%、0.24%和2.63%。以上研究结果初步表明,在农村地区生活污水生物处理设施各工段中,均存在一定的潜在致病性微生物;尤其值得注意的是,在不进行消毒的状态下,出水中也包含多种潜在致病性微生物,其排放对周边环境及人体健康可能存在一定影响。本研究结果可为后续村镇小型污水处理设施的健康风险评估提供参考。

English Abstract

  • 已有研究[1-2]表明,生活污水中包含一定量的潜在致病微生物(大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌等)。因此,在污水处理系统末端需增加消毒,处理达标之后方可排放。近2年,随着新冠疫情的全球肆虐,不同层面的生物安全问题受到了广泛关注。我国于2021年4月15日起全面实施《生物安全法》,标志着我国生物安全问题进入了依法治理的新阶段[3]。目前,我国现行城市污水生物处理过程中已全部覆盖消毒工艺。但是,对于卫生设施相对薄弱的农村地区,污水中潜在致病微生物的分布、相应污水处理设施的消毒效果等仍存在认识不清、运维不稳等问题,从而对农村地区居民身体健康及区域生态安全造成了极大的潜在风险。

    截至2020年,全国共有约5.1亿农村人口,占全国总人口的36%,生活污水排放量很大,而目前针对已有农村污水处理设施的监测重点仍然为COD、NH3-N、TP等基础水质排放控制指标[4-5]。农村生活污水主要来源于厨房污水、生活洗涤污水和冲厕水等,其具有分散性强、水质水量变化大等特点;同时,我国农村区域相对城市而言,经济水平比较低。因此,成本低廉、高度集成、占地面积较小、施工工程量小、运行维护简便的小型化、装备化污水处理设施在农村地区得到广泛应用,净化槽即是其中一种[6-10]。基于其在单户或联用处理中的优势,目前净化槽已经在上海、江苏、云南、山东、黑龙江等地多数农村投入实际使用[11]。调研发现,目前市场上销售的净化槽在工艺单元是配有消毒设施的。但在实际运用中,由于消毒工艺投入成本高,投入的化学消毒试剂如次氯酸钠等在维护不当时可能会造成泄露而引起二次污染,因此,大部分农村地区一体化污水处理设备的消毒设施处于闲置状态,农村污水处理后,未经消毒就直接排放[10]。基于以上研究现状,本研究选取江苏省常熟市虞山街道(N 120°40′48″,E 31°40′48″)处理量为1 m3·d−1的一体化污水处理设施,解析不同工段潜在致病微生物的分布特征,为后续村镇小型污水处理设施运行过程中的健康风险评估研究提供参考。

    • 本研究选择江苏省常熟市虞山街道(N 120°4′48″,E 31°40′48″)处理量为1 m3·d−1的一体化污水净化槽(HJA-10,江苏中车环保设备有限公司;长×宽×高=2 190 mm×1 120 mm×1 550 mm)进行研究。净化槽采用A/O处理工艺,主要由夹杂物去除槽-厌氧滤床槽-载体流动槽-沉淀槽-消毒槽处理单元组成(图1)。其中厌氧滤床槽采用PE滤料,载体流动槽即为加有曝气设施和圆球状填料的生物处理单元,消毒槽设定为添加三氯异氰尿酸消毒剂消毒。该村现有农户370多户,共计1 500余人,其中青年人(非假期外出务工、上学等)和老年人(长期在当地居住)的占比分别为60%和40%。净化槽主要收集处理村民家中排放的生活污水(厨房洗涤废水、洗漱用水、马桶废水等),实际运行时,槽中污水依次经过夹杂物去除槽、厌氧滤床槽、载体流动槽和沉淀槽,载体流动槽出水处设有回流管,向夹杂物去除槽回流。

    • 样品按照《水质采样技术指导》( HJ 494-2009 ) 和《水质采样样品的保存和管理技术规定》( HJ 493-2009 ) 要求[12-13],分别从净化槽进水口(A1)、夹杂物去除槽(A2)、厌氧滤床槽(A3)、载体流动槽(A4)、沉淀槽(A5)、出水口处(A6)、出水受纳水体(A7),各采集1 L水样。采样容器材质为聚乙烯,容器采样前均进行灭菌处理,以满足采样需要。水样分别采集于夹杂物去除槽液面下0.8 m,厌氧滤床槽、载体流动槽、沉淀槽液面下0.3 m。各处理单元所采样品分成2份:1份于4 ℃保存,用于理化指标测定;另1份存于−20 ℃,用于微生物多样性分析。

    • 采用重铬酸钾法(HJ 828-2017)测定COD值[14];采用纳氏试剂分光光度法(HJ 535-2009)测定NH3-N浓度[15];采用哈希法测定TN浓度;采用重量法(GB 11901-1989)测定SS浓度[16]

    • 利用引物338F(5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3')和806R(5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3')对 16S rRNA基因V3~V4 可变区进行 PCR 扩增[17-18],产物纯化定量后通过Illumina Miseq平台进行测序。使用UPARSE软件,根据97%的相似度对序列进行聚类并剔除嵌合体,然后利用RDP classifier对每条序列进行物种分类注释,比对数据库,设置比对阈值为70%,最终生成操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU) [19-21]。利用mothur进行微生物群落的α多样性分析,计算参数分别为Ace、Chao1、Shannon和Simpson指数。Ace和Chao1指数反映微生物种群丰度,其值越高表明微生物丰度越高;Shannon和Simpson指数反映微生物种群多样性,高Shannon指数和低Simpson指数代表高多样性,其数值受样品群落中丰度和物种均匀度的影响[22]。多样性指数根据式(1)~式(3)计算[23]

      式中:SChao1表示估计的OTU数;Sobs表示实际测得OTU数;n1表示只含1条序列的OTU数;n2表示只含2条序列的OTU数。

      式中:Sobs表示实际测得OTU数;ni表示第i个OTU所含序列数;N表示所有序列数。

      式中:Sobs表示实际测得OTU数;ni表示第i个OTU所含序列数;N表示所有序列数。

    • 对首次投入使用的一体化污水净化槽进行长期连续进出水水质监测,时间为200 d。结果如图2所示。运行期内,设备进水中COD值为27~537 mg·L−1,NH3-N和TN的质量浓度分别为13~174 mg·L−1和15~238 mg·L−1。50 d内,设备运行处于启动状态,COD去除效果较好, NH3-N和TN去除波动较大。随着设备的运行,在50 d后,其出水COD值稳定在(35.5±22.5) mg·L−1,NH3-N和TN的质量浓度稳定在(5±3) mg·L−1和(22±10) mg·L−1,表明该设备出水水质达到了《农村生活污水处理设施水污染物排放标准》(DB 32/ 3462-2020)[24]

      在装置运行约100 d后,考察不同工段污水中NH3-N、SS质量浓度和COD值的沿程变化,结果如图3所示。沿设备运行工段流程,NH3-N、SS质量浓度和COD值均呈逐步下降趋势,NH3-N在A2、A3、A4、A5、A6单元的去除率分别为55.42%、67.47%、70.48%、92.77%、93.98%;SS在A2、A3、A4、A5、A6单元的去除率分别为54.35%、82.61%、86.30%、96.09%、96.52%;COD在A2、A3、A4、A5、A6单元的去除率分别为13.50%、32.43%、54.46%、89.19%、94.59%。以上结果表明,该设备处于长期稳定运行状态,并且不同处理单元对污染物的去除率有所不同。

    • 采用高通量测序分别对不同处理单元中样本进行了细菌多样性分析,其中Ace和Chao1指数用来表征不同处理单元微生物种群丰度,Shannon和Simpson指数用来表征微生物种群多样性,具体结果如表1所示。由表1可以看出,A3单元Chao1和Ace值最高,分别为2 404.32和2 396.72;Shannon指数最高、Simpson指数最低,分别为5.49和0.01。在该设备中,A3单元中细菌不仅丰度最高,而且多样性也是最高的。这可能与本设备中污水的流程有密切的关系,污水经夹杂物去除槽后,首先进入厌氧滤床槽。因此,该单元有机物更为丰富,异养微生物快速繁殖,从而导致该单元细菌种类及丰度均相对较高。这一结果与前人研究结果存在一定的差异。黄潇等[22]发现,当采用多级A/O工艺处理城市污水时,最高的Shannon和Simpson指数出现在第2好氧区,这可能与工艺流程和污水来源的差异有关。

    • 进一步分析受纳水体和设备运行稳定状态下不同单元中细菌种群结构特征,其差异如图4所示。在门水平上,进水中ProteobacteriaFirmicutes是优势菌门,其相对丰度分别为56.21%和37.65%。随着污水流经各处理单元,这2个菌门虽然仍然处于优势地位,但其相对丰度却逐步下降。由图4可见,由A2到A5,Proteobacteria相对丰度分别为48.00%、45.33%、44.58%和41.47%。Proteobacteria在各单元中检测片段数基本不变,在A2~A5单元相对丰度降低是由于各单元其他菌门种类和丰度的增加。由A2到A5,Firmicutes相对丰度分别为15.04%、6.14%、5.21%和5.27%。A2单元Firmicutes相对丰度下降主要是由其门下Chryseomicrobium属相对丰度急降所导致;在A3~A5单元,Firmicutes所测片段数基本不变,其相对丰度变小是由各单元其他菌门种类和丰度的增加所导致。在出水中,检测到的细菌总片段变少,导致Proteobacteria相对丰度增高,此时Firmicutes门下梭菌纲丰度上升是导致Firmicutes相对丰度上升的主要原因,梭菌纲适合在氧气浓度相对较低的出水中繁殖。同时,图4中的结果也表明,进水中Bacteroidota相对丰度较低,为1.08%,但在各单元中Bacteroidota相对丰度呈现逐步升高趋势,尤其是在A4和A5单元,其相对丰度分别可达31.43%和37.42%,这与已有研究结果基本一致 [25-26]Bacteroidota相对丰度变化主要由其门下Flavobacterium属相对丰度变化引起,Flavobacterium是一种好氧反硝化细菌,适合在含氮物质和氧气含量充足的环境中生存。 本研究中,净化槽消毒单元处于关闭状态,因此,出水中检出的细菌多样性也较高,Proteobacteria仍是优势菌门,其相对丰度为53.41%,FirmicutesBacteroidotaPatescibacteriaActinobacteriota的相对丰度也分别达到了11.31%、11.73%、11.86%、4.68%。与净化槽出水相似,排水口处受纳水体中Proteobacteria也是优势菌门,相对丰度为89.09%,且PatescibacteriaActinobacteriota相对丰度则显著降低,这可能是由受纳水体中微生物相互作用导致的。

      为了更加准确地反映净化槽不同单元和受纳水体中细菌的组成,对所选样本中细菌种群特征进行了属水平上的分析。结果如图5所示,进水中细菌种群相对简单,其中优势菌属为Paracoccus(43.31%)、Chryseomicrobium(26.00%)、Trichococcus(6.60%)和Pseudomonas(5.00%)。同样在有夹杂物的去除槽内,其细菌种群相对也较为简单,不同之处在于其优势菌属发生了明显变化,分别为Acinetobacter(38.70%)、norank_f__norank_o__norank_c__Gracilibacteria(7.54%)和Romboutsia(3.48%)。其原因可能是,在物理去除污水中较大颗粒物的同时,附着在颗粒物上的细菌也一并被去除,从而导致其优势菌属种类发生了变化。与其形成明显对比的是,A3、A4、A5单元中细菌菌属多样性明显增加,并且该3个单元中细菌相似性明显升高。除无法鉴定种类的others之外,A3单元中主要细菌菌属分别为Acinetobacter(6.38%)、norank_f__norank_o__Saccharimonadales(5.11%)、Pseudorhodobacter(4.52%)、Flavobacterium(2.85%)、Pseudomonas(1.29%)等。在A4、A5单元里,这些细菌菌属种类并未发生明显变化,但其相对丰度呈现一定差异。在A3、A4、A5单元中,Flavobacterium相对丰度呈现逐步上升趋势,分别为2.85%、18.12%、23.19%。Flavobacterium是活性污泥工艺的常见的好氧反硝化菌[27],适合在含氮物质和氧气含量充足的A4、A5单元中生存,A3单元的厌氧环境并不适合其生存。在A3、A4、A5单元中,Acinetobacter相对丰度呈现逐步下降趋势,分别为6.38%、3.95%、0.57%。Acinetobacter是水处理过程中常见的异养硝化-好氧反硝化细菌[28],所以在有机物质量浓度相对较低的A4、A5单元中并不利于其生长,导致其相对丰度下降。在A3、A4、A5单元中,Pseudomonas相对丰度呈现逐步下降趋势,分别为1.29%、0.83%、0.72%。有研究[29]表明,在人工湿地等脱氮除磷工艺中发现了参与有机物去除的Pseudomonas,因此,对于有机物质量浓度相对较低的A4、A5单元,Pseudomonas相对丰度可能会有所下降。与出水相比,受纳水体细菌组成出现显著变化,其中C39Pseudomonas为主要的优势菌属,相对丰度分别为67.61%、10.21%,二者总相对丰度超过75%。

    • 进一步深入分析本研究中一体化污水净化槽各处理单元的细菌特征,结果发现,其检出的潜在人致病性细菌种类丰富,并且各个单元的种类及含量也存在一定差异。进水中共检测到16种潜在致病细菌属, 而出水中则检出了20种潜在致病细菌属。有研究[30-39]表明,出水中检出的相对丰度较高的KlebsiellaAeromonasArcobacterNeochlamydiaClostridium_sensu_stricto_10MycobacteriumPseudomonasBacteroidesAcinetobacterFlavobacterium均对人体存在潜在危害。Aeromonas hydrophila普遍存在于淡水、污水、淤泥、土壤和人类粪便中,可引起多种水产动物的败血症和人类腹泻[30]Klebsiella pneumoniae是人类呼吸道和肠道的常居菌,可引起下呼吸道、血液、泌尿道、消化道、手术切口、颅内、皮肤软组织等多个部位感染[31]Arcobacter skirrowii与人类和动物的腹泻、菌血症等疾病密切相关[32];属于易引起疾病衣原体目的Neochlamydia,对人体健康也存在潜在威胁[33]Mycobacterium tuberculosis可引起人体结核病,一种传染性疾病,主要是通过呼吸道传播,以肺结核为最多见[34]Pseudomonas aeruginosa为假单胞菌属中最为常见的一种机会致病菌,常可引起尿路感染、烧伤创面及褥疮感染、败血症和肺部感染等[35]Bacteroides fragilis系革兰阴性厌氧菌,由于其具有黏附性、血细胞凝集素、多糖胶囊、菌毛等多种毒力因素,在拟杆菌属中致病性最强,其可引起腹腔感染、术后伤口感染、糖尿病足感染、菌血症等[36]Acinetobacter bamnannii是我国医院感染最主要的致病菌之一,该菌最常引起的感染为下呼吸道感染,尤其为呼吸机相关性肺炎,其次为血流感染[37]Clostridium perfringens广泛存在于自然界及人和动物的肠道中,是近年来我国家畜“猝死症”的主要病因,可引起气性坏疽和食物中毒的主要病原菌坏死性肠炎[38]Flavobacterium可引起肺炎,也可招致脑膜炎、败血症等感染,该菌会在机体免疫力下降时引起感染[39]。以上结果表明,当污水生物处理设施末端出水不经消毒处理时,其出水中潜在致病微生物的危害可能存在升高趋势。本研究选取了9种对人体危害性较大的致病细菌,对其在不同单元中的相对丰度变化进行了分析,结果如图6所示。不同致病细菌的变化趋势各有差异,总体可分为以下3类。

      第1种为进水中相对丰度较低,但在设备不同单元随着污水流向相对丰度逐步呈升高趋势。Aeromonas Klebsiella在进水中几乎未检出,但在A2、A3、A4、A5、A6的相对丰度则分别升高至0.007 4%和0.002 5%、0.15%和0.004 5%、0.066%和0.001 9%、0.37%和0.005 9%、1.26%和0.70%。Arcobacter (0.01%)和Bacteroides(0.21%)在进水中有少量检出,但在不同单元中也均呈现上升趋势,A2、A3、A4、A5、A6的相对丰度分别为0.064%和0.80%、0.047%和0.34%、0.068%和1.06%、0.069%和1.22%、0.24%和2.63%。这可能是因为AeromonasKlebsiellaArcobacterBacteroidesPseudomonas等菌属细菌是活性污泥中大量存在且具有降解有机污染物功能的菌属[24,29,40]。因此,相对进水而言,后续各处理单元中这些细菌的相对丰度呈现出上升趋势。

      第2种为进水中相对丰度较低,但在整个水处理过程中其相对丰度呈现先上升后下降趋势。Mycobacterium(0.04%)和Neochlamydia(0.02%)在A2、A3、A4、A5、A6的相对丰度分别为0.35%和0.045%、0.78%和0.54%、0.47%和0.24%、0.41%和0.39%、0.27%和0.26%。这2种致病细菌丰度的最大值均在A3单元,可能是由于这2种细菌均属于厌氧菌,当溶解氧浓度较高时会抑制其活性,甚至会影响其生存。同样,Flavobacterium (0.04%)在A2、A3、A4、A5、A6的相对丰度也呈现出先上升后下降趋势,分别为0.10%、2.85%、18.12%、23.18%、1.32%,但下降点在A5单元,这可能因为Flavobacterium同时是一种好氧反硝化细菌[24],在氮物质、有机物含量相对较低环境中会影响其繁殖,导致其相对丰度下降。

      第3种为进水中相对丰度较低,但在整个水处理过程中呈现先上升后下降再上升趋势。Clostridium_sensu_stricto_10在进水中的相对丰度为0.06%,而在设备其他处理单元的相对丰度分别为A2(1.30%)、A3(0.85%)、A4(0.30%)、A5(0.31%)、A6(1.84%),其相对丰度的峰值分别在A2和A6中。高通量测序结果显示,各单元检测总片段分别为38 979、40 364、44 672、51 735、50 945、36 408。分析高通量测序结果表明,A1、A2、A3、A4、A5和A6单元中Clostridium_sensu_stricto_10的核酸检出片段量分别为23、525、378、154、159、669。造成这种现象的原因可能是:在功能单元中功能菌种类和相对含量增大,而Clostridium_sensu_stricto_10较功能菌对营养物质的竞争力较小,导致相对丰度下降,但具体原因需要进一步开展研究。以上分析结果表明,无论那种类型变化趋势,其设备出水中均包含一定量的潜在致病性细菌。

    • 1)所研究的一体化污水净化槽设施处理农村生活污水时,不同处理单元细菌中群结构呈现一定差异,尤其是进水、夹杂物去除槽和后续生化处理单元之间。出水中也包含多样性丰富的细菌。

      2)本研究在一体化污水净化槽中共检出21种潜在致病细菌,以FlavobacteriumPseudomonas等为主。值得注意的是,在其出水中存在20种潜在致病细菌,并且有9种优势潜在致病细菌的相对丰度较进水存在明显升高现象。

    参考文献 (40)

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