1) AOB。AOB是一类化能自养型微生物，分为5个属：Nitrosomonas、Nitrosospira、Nitrosolobus、Nitrosovibrio、Nitrosococcus^[6]。在当前污水处理研究中报道的AOB均属于这5个菌属^[7]。不同的AOB菌属表现出不同的生物特性。在已知AOB菌属中，AOB对DO的亲和能力 (以氧的半饱和系数K_o表征) 为0.03~0.30 mg·L⁻¹，对底物NH₄⁺-N的亲和能力(以氨氮饱和系数K_s表征)为0.50~1.62 mg·L^{−1 [8-14]}。2) NOB。NOB是一类具有专一性的化能自养型微生物，分为7个属： Nitrobacter、Nitrococuus、Nitrospina、Nitrospira、Nitrotoga、 Nitrolancea和andidatus Nnitmaltima^[15]。在污水处理中，主要以Nitrospira和Nitrobacter这2类菌属为主。在已知NOB菌属中，NOB的K_o为0.43~1.98 mg·L⁻¹，对底物的K_s为0.11~13 mg·L^{−1 [14-23]}。3) AnAOB。AnAOB的系统发育地位属于浮霉状菌目 (Planclomycetales) 。现已发现的菌属有6类：Caudidatus Brocadia、Caudidatus Kueueuia、Caudidatus Scaliudua、Caudidatus Auammoxoglobus、Caudidatus Jetteuia 和 Canditatus Anammoximicrobium^[15]。在污水处理系统中，Caudidatus Brocadia和Caudidatus Kueueuia较为常见。AnAOB为自养菌，在32~33 ℃的倍增时间约为11 d^[24]。在已知AnAOB菌属中，AnAOB对底物NH₄⁺-N的K_s为0.10~0.39 mg·L⁻¹，对底物NO₂⁻-N的K_s为0.01~0.51 mg·L^{−1 [24-27]}。

稳定高效的亚硝化过程是厌氧氨氧化发挥脱氮效能的基础。在这个过程中，伴随着NOB氧化中间产物NO₂⁻-N过程，NOB与AOB对DO的竞争及与AnAOB对NO₂⁻-N的争夺，都会影响PN/A工艺稳定运行。因此，主流条件下，维持稳定的亚硝化过程，关键是实现NOB活性的稳定抑制^[25]。对比3类主要功能微生物动力学特性 (表1) 。当游离氨 (FA) 质量浓度为10~150 mg·L⁻¹时会抑制AOB，而FA对NOB抑制作用更强，在FA质量浓度为0.1~1.0 mg·L⁻¹时即对NOB有抑制作用。

AOB、NOB、AnAOB和异养菌 (heterotrophic bacteria, HB) 是参与主流PN/A工艺的主要菌群。HB又分为反硝化菌和普通异养菌 (ordinary heterotrophic bacteria, OHB) 。各类微生物间的相互作用关系见图1。其中，AOB、NOB与OHB竞争氧气；NOB、AnAOB与反硝化菌竞争NO₂⁻-N；反硝化菌和OHB竞争有机碳^[22]。探究各类微生物特性和相互间复杂的协作竞争关系，从而挑选出有利于主流PN/A工艺长期稳定运行的功能微生物，对主流PN/A工艺稳定运行调控是十分有意义的。NOB是主流PN/A工艺中最主要的竞争性微生物，实现对NOB的有效抑制是当前主流PN/A工艺稳定运行的关键。

DO限制是NOB氧化亚硝酸盐的关键限制性因素。相对于NOB，AOB对DO具有更强的亲和力，其氧饱和常数为0.25~0.50 mg·L⁻¹，而NOB的氧饱和常数为0.72~1.84 mg·L^−1[27]。因此，在低曝气量下运行时，AOB比NOB的生长优势更强。WANG等^[28]发现，当DO从1.5 mg·L⁻¹降至0.3 mg·L⁻¹，亚氮积累率 (nitrous accumulation rate, NAR) 从30%增至95%。然而，在DO为0.3 mg·L⁻¹的条件下运行3个月后，NAR降至10%。CUI等^[29]发现，控制反应器内DO为0.5 mg·L⁻¹，在运行的前30 d，反应器内NAR大于90%；运行70 d以后，NAR降至80%以下；运行至第130天，NAR已降至10%以下，此时短程硝化转变为完全硝化，NOB活性抑制失效。包鹏等^[30]发现，Nitrospira在低DO运行时的含量远高于Nitrobacter；在高DO运行时，Nitrobacter逐渐取代Nitrospira，成为优势菌属，而Nitrospira逐渐消失。随着DO的变化，NOB的优势菌属会发生可逆变化，长期低DO运行，NOB活性逐渐恢复。尽管控制DO是实现亚硝化的有效途径，但长期抑制NOB活性和增殖的目标尚不能实现，调控DO以实现抑制NOB也存在争议。因此，在PN/A工艺中除了进一步优化DO限制的控制策略外，还应与其他方法联用，以加强NOB活性抑制效果。

在主流条件下，通过创造交替缺氧与好氧的环境让污泥经历缺氧/好氧变化，有助于抑制NOB的活性。目前，普遍认同的抑制机理有：一是DO作为AOB和NOB共同的底物，AOB的氧亲和力高于NOB，控制合理DO，可在不影响AOB 活性的同时抑制 NOB 生长；二是利用NOB从缺氧阶段转变为好氧阶段后活性恢复的滞后性，采取好氧-缺氧交替以不断改变DO，利用其差异从而实现对NOB的有效抑制；三是好氧-缺氧交替扰乱生物的代谢过程，从而产生有抑制性的中间产物，如NO。QIU等^[31]采用间歇曝气策略，设置曝气时间30 min、停曝时间15 min、DO<0.5 mg·L⁻¹的反应条件，结果使氨氮转化率 (ammonia nitrogen conversion rate, ACR) 达到93.3%，NAR达到95%。这表明间歇曝气可抑制NOB生长。MIAO等^[32]采用间歇曝气策略，设置曝气时间7 min、停曝时间21 min、DO<0.3 mg·L⁻¹。在该条件下，ACR达到81%，出水NO₃⁻-N<2 mg·L⁻¹，这说明NOB的活性出现显著下降。XIE等^[33]通过接种不同污泥，采用间歇曝气策略，考察了不同停曝比对NOB活性抑制的影响，发现在接种普通污泥和不稳定亚硝化污泥的反应器内， ACR分别为75.11%和65.65%，NAR均为0。这表明在接种这2类污泥的反应器内，间歇曝气无法抑制NOB活性。而在接种成熟的亚硝化污泥反应器内，平均ACR为65.42%，NAR也会从97.95%逐渐降至9.36%，这表明当接种该污泥时，反应初期NOB活性被短暂抑制，但随着反应时间延长，NOB活性不断恢复，最终NOB抑制失效。在上述研究中，尽管间歇曝气创造了缺氧/好氧交替和低DO环境^[32-31]，但当接种不同特性的污泥时，却无法全部实现NOB抑制。因此，在间歇曝气成功应用的案例中，可能还存在未被发现的其他抑制机制，间歇曝气对NOB活性的抑制机制还有待进一步研究。

生物强化策略是在PN/A系统中投加高AOB、AnAOB丰度的污泥，以提高生物质浓度的同时降低NOB的相对丰度，从而使NOB处于竞争劣势，实现城市污水部分亚硝化。如奥地利Strass污水处理厂在主流工艺上安装旋流器^[34]，通过旋流器从侧流 (污泥消化液) 中分离AnAOB和AOB补充主流工艺，从而强化AOB在主流中的数量，实现了对NOB的抑制^[30]。曹丽娟等^[35]发现，将主流反应器内的污泥混合液与侧流反应器内的污泥消化液进行交换，通过7 d交替40%污泥混合液的方式运行，总氮去除速率 (nitrogen removal rate, NRR) 达到0.08 kg·(m³·d)⁻¹，总氮去除率 (nitrogen removal efficiency, NRE) 达到70%。当污泥消化液温度和NH₄⁺-N质量浓度较高时，可为主流工艺提供富含AOB的亚硝化污泥来实现稳定的亚硝化。但值得思考的是，当侧流工艺中不能满足主流区对亚硝化污泥的需求量时，如何连续不断地给主流工艺提供亚硝化污泥，使主流PN/A工艺稳定运行。另一方面，如何确定侧流中短程硝化污泥给主流的补给量，使其能满足主流PN/A工艺中NH₄⁺-N与NO₂⁻-N的基质配比需求，仍尚待研究。

在城市污水PN/A系统中，特定化学物质的投加可降低NOB活性，又对其他脱氮功能微生物作用较小^[28]。NO、NO₂等氮氧化合物和NH₂OH、N₂H₄等AnAOB代谢中间产物可作为NOB抑制剂，对系统脱氮性能有改善作用^[34]。LI等^[36]研究了NH₂OH对好氧颗粒污泥PN化的影响，发现NH₂OH投加质量浓度为8 mg·L⁻¹时对NOB抑制效果最佳。然而，WANG等^[37]发现，NH₂OH对NOB的抑制为可逆性抑制，当NH₂OH停止投加时，系统的硝酸盐会再次积累，NOB抑制失效^[38]。因此，投加抑制剂对NOB抑制是可行的，若要维持长期、稳定的NOB抑制效果，则需不断地投加抑制剂，这无疑会增加成本，有悖于可持续发展理念。

污泥龄 (sludge retention time，SRT) 筛选即利用AOB与NOB生长速率间的差异，通过控制系统SRT大于AOB的世代周期，而小于NOB的世代周期，使AOB在系统内保持较高的浓度，而NOB被淘洗出系统^[36]。在高温下，通过短SRT成功淘洗NOB的研究早有报道。在28~30 ℃下，新加坡樟宜污水处理厂将SRT控制为2.5 d，有效地维持了部分亚硝化^[38]。LI^[36]和HUBAUX等^[39]均在30 ℃条件下，通过控制SRT (10~15 d) 实现了对NOB的有效抑制。而在中、低温条件下，随着AOB活性的受限，AOB与NOB很难形成很高的生长速率差，故利用SRT控制较难实现对NOB的淘洗^[12]。高佳琦将^[40]温度控制在20~25 ℃，在DO为0.27 mg·L⁻¹时，将SRT从21 d缩短至10 d，以达到淘洗NOB的目的。尽管此时PN区的NAR随着排泥从38%增至62%，硝酸盐生成速率 (NaPR) 亦从0.1 kg·(m³·d)⁻¹降至0.05 kg·(m³·d)⁻¹，NOB活性显著降低，但系统生物量随着SRT的缩短而减少，造成NOB活性抑制效果不稳定。这与SEUNTJENS等^[41]的研究结果一致。

目前，研究者多采用一段式反应器开展PN/A工艺的SRT筛选。在一段式反应器中，AnAOB颗粒污泥与硝化絮状污泥共存，SRT的调控受AnAOB低生长速率限制，因此，很难通过SRT筛选实现稳定、高效的亚硝化。相比于一段式，两段式反应器可为各功能微生物创造适宜的生存环境，在不同反应器中富集AOB和AnAOB，避免AnAOB与NOB对NO₂⁻-N的竞争，还可对不同区进行SRT控制，从而实现稳定、高效的亚硝化。因此，更有望通过两段式反应器开展PN/A工艺的SRT筛选研究，以实现稳定、高效的亚硝化。

低NO₂⁻-N策略是基于AnAOB对亚硝酸盐的亲和常数 (K_s= 0.005 mg·L⁻¹) 比NOB (K_s=0.5 mg·L⁻¹) 低的原理提出^[40-43]。这表明AnAOB会优先利用产生的NO₂⁻-N，使得AnAOB与NOB在争夺底物NO₂⁻-N时竞争力更强，从而使得NOB缺少底物而生长被抑制。GU ^[44]发现当DO为1.2~1.5 mg·L⁻¹，将每个缺氧段出水的NO₂⁻-N控制在1.5 mg·L⁻¹以下，NAR可达到92.5%，从而实现NOB抑制，并达到了0.16 kg·(m³·d)⁻¹的脱氮效率。林兴^[45]控制进入PN段的NO₂⁻-N质量浓度为2.04 mg·L⁻¹，NO₃⁻-N质量浓度为13.75 mg·L⁻¹，此时PN区硝氮生成速率 (nitrate nitrogen produce rate，NaPR) 从123.45 g·(m³·d)⁻¹降至116.22 g·(m³·d)⁻¹，出水NO₃⁻-N维持稳定。这表明系统内NOB活性受到了抑制，脱氮效率达到0.29 kg·(m³·d)⁻¹。然而，目前国内外对该策略研究仍较少，低NO₂⁻-N控制对NOB的抑制还需进一步系统研究。

实现NOB的有效抑制是目前主流PN/A工艺的瓶颈。在现阶段的主流条件下，传统单一的NOB抑制策略虽取得了一定进展，但实施效果不佳，长期运行仍无法实现稳定的NO₂⁻-N积累。NOB会通过二次增殖、优势菌种演替等方式对某一特定的控制策略产生适应性，这就造成了单一的控制策略对NOB所产生的抑制效果具有暂时性、可逆性的特点，使得二次增殖产生的NOB，很难通过原来的手段被有效控制^[46]。近年来，研究者们试图构建实现多重调控的PN/A系统来解决NOB抑制问题，已证实了多重策略联用实现长期NOB抑制的可行性。

林兴^[45]构建了分区一体式PN/A反应系统 (图2) 。PN区采用生物膜，AN区采用悬浮污泥。通过气升装置将AN区出水回流至PN区，通过设置不同的回流比促使PN区低NO₂⁻-N (2.04 mg·L⁻¹)的实现。调节PN区曝气量将DO控制在0.3 mg·L⁻¹。运行结果表明，反应系统的NRR为0.2 kg·(m³·d)⁻¹，NRE为55%，d(NO₃⁻-N) /d(NH₄⁺-N)=0.25，NOB抑制效果较好。d(NO₃⁻-N) /d(NH₄⁺-N)这一比值表明亚硝化反应出水的NO₃⁻-N由NH₄⁺-N转化的比例，该值越小则表示NOB抑制效果越好。但也发现，NOB会附着在PN区的膜上导致后期难以去除，使得NOB活性的抑制效果不稳定。高佳琦^[40]在上述反应器的基础上，将PN区生物膜换成了悬浮污泥，通过PN区排泥实现短SRT (10 d) 控制，结合低NO₂⁻-N(2 mg·L⁻¹)，低DO(0.3 mg·L⁻¹)，在反应器运行初期，实现了NAR为30%~40%，这表明NOB活性得到了有效抑制。但随着反应时间延长，系统生物量不断减少，系统脱氮性能不断降低，NOB抑制效果依然不稳定。

GU ^[44]构建了连续多级一体式PN/A系统 (图3) ，在好氧区 (PN) 采用活性污泥，缺氧区 (AN) 在采用anammox的生物填料。采用多点进水的方式，多级分段设置回流，污泥在空间上不断经历好氧和缺氧变化，通过N₂进行混合，再经过厌氧氨氧化过程，使每个缺氧室的出水NO₂⁻-N 小于1.5 mg·L⁻¹。在下一个好氧室的NOB上产生了NO₂⁻-N限制的情况，控制DO在1.2~1.5 mg·L⁻¹，最终NRR为0.16 kg·(m³·d)⁻¹，NRE为87.13%, d(NO₃⁻-N) /d(NH₄⁺-N)=0.11，这说明NOB得到有效抑制。然而，从实现方式难度来看，N₂在实际应用中并不可行，且该工艺构造复杂。本课题组自主研发的反应系统采用分区一体化设计，利用气升回流使缺氧区出水回流至好氧区以稀释NO₂⁻-N质量浓度，该方式操作更为简单。但目前国内外对该策略的研究仍较少，低NO₂⁻-N策略对NOB的抑制还需进一步系统研究。

WANG ^[28]构建了生物膜和悬浮生长模式的一体化固定膜活性污泥反应器 (integrated fixed-film activated sludge，IFAS) (图4) ，这是一种混合一体式PN/A系统。实验在2个实验室规模的序批式反应器 (SBR) 上进行，反应器接纳实际主流废水，通过FA处理侧流污泥灭活NOB，使用低DO和厌氧氨氧化菌清除NO₂⁻-N。NOB对高FA、低DO均具有适应性，短暂抑制后NOB又大量繁殖，而耦合低NO₂⁻-N浓度策略后，维持有效的NOB活性抑制状态。与只有FA、低DO策略相比，在其他条件相同的情况下，NRE提高74％。出水NO₃⁻-N为4 mg·L⁻¹, d(NO₃⁻-N) /d(NH₄⁺-N)=0.1，这表明NOB活性得到了显著抑制。然而，采用混合构型的PN/A系统时，NOB会因附着在生物膜上而难以去除，导致PN/A工艺的效果和稳定性出现严重恶化。这与林兴等^[45]研究结果相似。同时，该工艺中高FA的实现是由于采用了侧流污泥处理的方式，在实际中操作难度相对较大，还需要进一步研究更简单的策略以耦合低NO₂⁻-N策略来实现对NOB的抑制。

以往研究表明，采用多重调控策略可能更有利于实现NOB抑制，但从系统脱氮性能、工艺稳定性等角度来看，仍无法运用到实际工程中。一方面，尽管联合调控已成为共识，但目前对于联合调控如何实现的问题还未找到切实可行的对策；另一方面，传统实验方法探究多重调控策略对NOB抑制效果的协同关系存在盲目性，在实际运行中去探索新的调控参数面临着耗时长、难稳定的困扰。ASM是1983年由国际水质协会(International Association on Water Quality，IAWQ)组织专家经过多年收集、分析、比较、归纳，在前人建立的活性污泥模型基础上提出的污水处理模型^[47]，可用于表征不同调控策略下AOB、NOB生长、衰减过程，以快速获取不同参数条件下的稳态运行结果，从而对实际调控给予一定的指导方向，推动对工艺参数的研究进展^[48]。

毛鹤群^[49]选用活性污泥数学3号模型 (ASM3) 作为基础模型，在SBR反应器中模拟了高温 (32 ℃) 、高pH值 (8.0~8.7) 和低曝气量 (25 L·h⁻¹) 联合策略对NOB抑制效果的影响。模拟结果表明，在该综合调控策略下，NRE达到98%，NAR>80%，NOB生长受到了抑制。蔡庆^[50]基于活性污泥模型 (ASM1) 中微生物生长衰亡理论，构建动力学模型，模拟了低DO ( (0.3±0.05) mg·L⁻¹) 、低曝气速率 (250~350 mL·min⁻¹) 联合策略对SBR短程硝化系统的影响。结果表明，空气曝气负荷/进水总氮负荷≈0.18 L·mg⁻¹时，系统NRE≈90%。徐婷^[51]采用构建的硝化模型，对SBR进行为期500 d的运行情况模拟，分析了SRT=1~10 d和DO<2 mg·L⁻¹的联合调控策略下对NOB活性抑制效果的影响。结果表明，当SRT=6 d，pH=7.3~8.0，DO=1.5 mg·L⁻¹时，NAR≈95%，NOB活性抑制效果显著。在上述的研究工作中，模型模拟发挥了重要支撑和引导作用。这表明该模型是探讨主流PN/A工艺模型构建、动力学调控以及作用机制的可行有效的工具。

PN/A工艺强化城市污水脱氮的理论和应用价值明显，然而复杂的工艺流程和运行调控策略提高了该技术的应用门槛。主流城市污水低温、低NH₄⁺-N的水质特点，导致的NOB抑制问题仍是PN/A工艺应用的瓶颈。多种策略联合调控抑制NOB已成为共识，但如何经济有效、可持续、因地制宜地实现工艺的稳定运行仍需进一步系统研究。同时，采用ASM模型模拟可有力支持系统，增加运行灵活性的假设，显示了其对主流PN/A工艺中NOB抑制的潜力。本文结合对PN/A工艺中NOB抑制理论与策略的系统分析，提出未来可行的研究方向。

1) 选择工艺类型。尽管一体化PN/A 工艺较传统的硝化-反硝化工艺具有诸多优势，但对运行策略的严苛要求却使其始终无法推广至城市污水的工程应用。近年来，研究还开发了部分反硝化 (partial denitrification, PD) 作为厌氧氨氧化提供NO₂⁻-N的方案。与传统硝化反硝化相比，PD结合厌氧氨氧化 (partial denitrification anammox process, PD/A) 工艺可节省50%的曝气和80%的有机物需求^[23]。尽管节省量低于PN/A工艺 (60%的曝气和100%的有机物需求) ，但PD/A工艺的长期稳定性似乎更容易保持，是一项具有较强可行性的新型污水处理技术，有望为未来城市污水处理厂提质增效提供技术支撑。

2) 深化基础研究。分子生物学技术的发展促进了微生物组的深入研究，逐渐重视不同属、种水平NOB之间的差异，使抑制NOB活性的机制认知不断加深。全程硝化菌 (complete ammonia oxidizer bacteria, CAOB) 的发现为PN/A工艺中NOB的控制提供了新的视角。CAOB缓慢的比生长速度使其在短期内不会对PN/A工艺产生明显的影响，而是在长期的运行过程中对PN/A 工艺产生影响^[52]。因此，需要对Nitrotoga和CAOB等不同种属在PN/A工艺中的潜在影响和针对性的控制策略给予足够重视。同时，抑制效果可因反应器结构或运行方式的不同而受到影响，实验结果的重现性尚不能保证。因此，探讨一体化PN/A工艺中NOB增殖的触发机制，明确工艺长期稳定运行的边界条件，解决工艺的迅速启动和恢复问题，是未来研究的一个重要方向。

3) 重视应用研究。在向中试或工程应用推进时，PN/A工艺面临着模型放大、操作策略优化、操作成本控制等问题，而以投加抑制剂为代表的NOB控制策略虽然显示了良好的实验效果，但受限于成本因素，很难实现工程应用。因此，针对PN/A工艺存在的瓶颈问题，开发经济高效的抑制剂和适用于工程应用的不同工艺控制策略，以加强系统运行的稳定性，寻求经济性与实用性的平衡，是今后研究城市污水厌氧氨氧化脱氮的重要发展方向。